一、案例

在食品生产加工过程中，为使食品保持其特有的色泽，常加入漂白剂。食品中常用的漂白剂大多属于亚硫酸及其盐类，通过产生的二氧化硫的还原作用使之漂白，同时还有防腐和抗氧化作用。二氧化硫和亚硫酸盐具有一定的腐蚀性，残留量过高对人体有不良影响，须严格控制其使用量和残留量。我国《食品添加剂使用卫生标准》规定，二氧化硫、亚硫酸钠、低亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、焦亚硫酸钾或亚硫酸氢钠可以用于蜜饯类、饼干、竹笋、蘑菇及其罐头、葡萄糖、食糖、冰糖、饴糖、糖果、液体葡萄糖、葡萄酒、果酒等食品的漂白。残留量以SO2计，竹笋、蘑菇及其罐头、葡萄酒、果酒不得超过0．05g／kg，粉丝、粉条、饼干、食糖、糖果不超过0.1g／kg。

二、选用的国家标准

GB／T 5009．34—2003食品中亚硫酸盐的测定——盐酸副玫瑰苯胺法。

三、测定方法

1．试样处理

(1)水溶性固体试样(如白砂糖等) 称取约10.OOg均匀试样(试样量可视含量高低而定)，以少量水溶解，置于100mL容量瓶中，加入4mL氢氧化钠溶液(20g／L)，5min后加入4mL。硫酸(1+71)，然后加入20mL四氯汞钠吸收液,以水稀释至刻度。

(2)其他固体试样(如饼干、粉丝等) 称取5.0～10.0g研磨均匀的试样，以少量水湿润并移入100mL容量瓶中，然后加入20mL四氯汞钠吸收液，浸泡4h以上，若上层溶液不澄清，可加入亚铁氰化钾及乙酸锌溶液各2.5mL，最后用水稀释至l00mL刻度，过滤后备用。

(3)液体试样(如葡萄酒等) 直接吸取5．0～10．0mL试样，置于10OmL容量瓶中以少量水稀释，加20mL四氯汞钠吸收液，摇匀，最后加水至刻度，混匀，必要时过滤备用。

2．测定

吸取0.50～5.OmL上述试样处理液于25mL带塞比色管中。

另吸取0、O．2mL、0．40mL、0．60mL、0．80mL、1．OOmL、1．50mL、2．00mL二氧化硫标准使用液(相当于O、O．4µg、0．8µg、1．2µg、1．6µg、2．0µg、3．0µg、4．0µg二氧化硫)，分别置于25mL带塞比色管中。于试样及标准管中各加入四氯汞钠吸收液至10mL，然后再加入lmL氨基磺酸铵溶液(12g／L)、1mL。甲醛溶液(2g／L)及1mL盐酸副玫瑰苯胺溶液，摇匀，放置20min，用1cm比色杯，以0管调节零点，于波长550nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。

3．结果计算

X=A*1000/m*V/100*1000*1000

式中X——试样中二氧化硫的含量，g／kg；

A——测定用样液中二氧化硫的质量，µg；

m——试样质量，g；

V——测定用样液的体积，mL。

4．试剂

①四氯汞钠吸收液：称取13．6g氯化高汞及6．0g氯化钠，溶于水中并稀释至1000mL，放置过夜，过滤后备用。

②氨基磺酸铵溶液(12g／L)。

③甲醛溶液(2g／L)：吸取0．55mL无聚合沉淀的甲醛(36％)，加水稀释至l00ml，混匀。

④淀粉指示液：称取1g可溶性淀粉，用少许水调成糊状．缓缓倾入100mL沸水中，随加随搅拌，煮沸，放冷备用，此溶液临用时现配。

⑤亚铁氰化钾溶液：称取10．6g亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O，加水溶解并稀释至100mL。

⑥乙酸锌溶液：称取22g乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]溶于少量水中，加入3mL冰乙酸，加水稀释至100mL。

⑦盐酸副玫瑰苯胺溶液：称取O.1g盐酸副玫瑰苯胺(C19H18N2CL4·H2O)于研钵中，加少量水研磨使溶解并稀释至100mL。取出20mL，置于100ml容量瓶中，加盐酸(1+1)，充分摇匀后使溶液由红变黄，如不变黄，再滴加少量盐酸至出现黄色,再加水稀释至刻度，混匀备用(如无盐酸副玫瑰苯胺，可用盐酸品红代替)。

盐酸副玫瑰苯胺的精制方法：称取20g盐酸副玫瑰苯胺于400ml水中,用50mL盐酸(1+5)酸化，徐徐搅拌，加4～5g活性炭，加热煮沸2min。将混合物倒入大漏斗中，过滤(用保温漏斗趁热过滤)，滤液放置过夜，出现结晶，然后再用布氏漏暑斗抽滤，将结晶再悬浮于1000mL乙醚-乙醇(10：1)的混合液中，振摇3～5min．以布氏漏斗抽滤，再用乙醚反复洗涤至醚层不带色为止，于硫酸干燥器中干燥。研细后储存于棕色瓶中。

⑧碘溶液[c(1／2I2)一0.100mol／L]。

⑨硫代硫酸钠标准溶液[c(Na2S2O3·5H20)一0.100mol/L]。

⑩二氧化硫标准溶液：称取0.5g亚硫酸氢钠,溶于200mL。四氯汞钠吸收液中，放置过夜，上清液用定量滤纸过滤备用。

二氧化硫标准溶液的标定：吸取10．0mL亚硫酸氢钠一四氯汞钠溶液于250mL碘量瓶中，加100mL水，准确加入20.00mL碘溶液(O.1mol／L)、5mL冰乙酸，摇匀，放置于暗处，2min后迅速以硫代硫酸(O.100mol／L)标准溶液滴定至淡黄色，加O.5mL淀粉指示液，继续滴至无色。另取100mL水，准确加入碘溶液20.0mL(0.1mol／L)、5mL冰乙酸，按同一方法做试剂空白实验。

二氧化硫标准溶液的浓度按下式计算：

X=(V2-V1*C*32.03)/10

式中 X——二氧化硫标准溶液的浓度，mg／mL；

V_l——测定用亚硫酸氢钠四氯汞钠溶液消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；

V₂——试剂空白消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；

c——硫代硫酸钠标准溶液的摩尔浓度，tool／L；

32.03——每毫升硫代硫酸钠[(Na2S2O3·5H2O)=1.000mol／L]标准溶液相当于二氧化硫的质量，mg。

⑥二氧化硫使用液：临用前将二氧化硫标准溶液以四氯汞钠吸收液稀释成每毫升相当于2µg二氧化硫。

⑥氢氧化钠溶液(20g／l)。

⑩硫酸(1+71)。

5．仪器

分光光度计。