一、保健食品中总蒽醌检验

(一)概述

1．主要来源葱醌类(anthraquinone)化合物广泛分布在自然界植物和菌类的代谢产物中，如豆科的决明子、番泻叶；百合科的芦荟；茜草科的茜草、鼠李；蓼科的大黄、何首乌等。目前发现的蒽醌类化合物近200种，如大黄酸、芦荟大黄素、土大黄素、大黄素甲醚等。

2．理化性质绝大多数蒽醌化合物都呈现黄、橙和红等不同的颜色，化合物多具有酚羟基或羧基，故多显酸性。游离蒽醌一般可溶于乙醇、乙醚、苯、四氯化碳等有机溶剂，不溶或微溶于水，而结合成苷后极性增大，易溶于甲醇、乙醇、热水中，几乎不溶于苯、乙醚、四氯化碳等有机溶剂。蒽醌化合物具有某些重要的颜色反应，如遇碱显橙、红、紫或蓝色；与醋酸镁的甲醇溶液反应能显橙红色或紫色。

3．保健功能蒽醌具有多种生理活性，主要有润肠通便作用；大多具有一定的抗菌活性；某些还具有显著的抑制肿瘤作用。但是蒽醌类化合物亦具有一定的不良反应，剂量过大会引起胃肠不适，严重的可能会导致胃肠出血、心悸等。故严格控制保健品中蒽醌类物质的质量十分必要。

4．分析方法保健食品中葱醒类成分含量测定方法有分光光度法、高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、荧光分析法、高效毛细管电泳法等。对于总蒽醌的测定一般采用分光光度法。

(二)分光光度法

1.原理保健食品中的蒽醌类化合物经酸水解后用四氯化碳提取，再用稀碱液萃取生成红色，与1,8-二羟基蒽醌对照品比较，在503nm波长处测定吸光度值，标准曲线法定量。

2．分析步骤

(1)样品处理：精密称取均匀的样品粉末(或量取适量的液体样品)，加2.5mol/L硫酸，沸水浴回流水解。冷却后加入四氯化碳萃取3次，合并萃取液，用蒸馏水洗涤两次，再反复用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取，合并萃取液，用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液定容。

(2)测定：以1,8-二羟基蒽醌为对照品，用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液配制标准系列。以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白对照，在503nm波长处测定吸光度值，由标准曲线法定量。

3．方法说明加入2.5mo1/L硫酸是将结合状态的蒽醌水解变为游离态，水解时要严格控制温度和时间。本方法适用于含决明子、番泻叶、芦荟、大黄、何首乌等植物原料或提取物的保健食品中总蒽醌的测定。

二、保健食品中红景天苷检验

(一)概述

1．主要来源红景天(rhodiola)系景天科红景天属植物，主要有效成分是红景天昔(salidroside)及其苷元，世界上有90余种，大多生长在北半球海拔3500～5000米左右的高寒地带。我国有73种，主要分布在青藏高原和长白山。

2．理化性质红景天苷分子式为C₁₄H₂₀O₇，分子量为300.3；为无色透明针状结晶，熔点为158～160℃；溶于水、乙醇、正丁醇，微溶于丙酮、乙醚；在酸性条件下，水浴加热回流2小时，水解完全，其水解产物为β-D-吡喃葡萄糖和4-羟基苯乙醇。

3．保健功能红景天苷具有提高细胞内DNA修补的能力，有抗癌转移功效。红景天苷在体外能促进T细胞功能，进而促进细胞免疫。红景天苷对脑缺氧、心肌缺氧、组织中毒性缺氧有明显的保护作用，另外还具有降血糖、保护神经细胞和肝、防辐射及抗病毒作用等。

4．分析方法保健食品中红景天苷含量测定常用高效液相色谱法，该法具有抗干扰能力强、定量准确、简单、快速的特点，是我国“保健食品检验与评价技术规范”的推荐方法。亦可采用分光光度法、气相色谱法和示波极谱法等。

(二)高效液相色谱法

1．原理保健食品中的红景天苷用甲醇超声波提取，经滤膜过滤后，以甲醇-0.02mol/L乙酸钠溶液为流动相，C₁₈ 柱分离，于215nm波长处检测，以保留时问定性，峰高或峰面积标准曲线法定量。

2．分析步骤

(1)样品处理：准确称取适量研细、混匀的片剂或胶囊内容物样品(或液体样品)，加入甲醇超声波提取10分钟，用甲醇定容。混匀后离心，经0.45um滤膜过滤后，供液相色谱分析用。

(2)测定：色谱条件为C₁₈色谱柱(250mm×4.6mm,5um)；柱温为室温；紫外检测器：检测波长215nm；流动相：甲醇-0.02mol/L乙酸钠溶液(9+91)；流速：1.0ml/min；进样量：10ul。

3．方法说明

(1)与索氏提取、超声波提取和加热回流提取法比较，综合考虑保健食品提取效率和提取时间，本实验处理样品采用甲醇超声波提取10分钟。对于组成复杂、干扰较多的保健食品样品，可采用聚酰胺柱净化除去黄酮类等杂质后，再进行高效液相色谱分析。

(2)红景天苷在215nm和280nm波长处有较强的吸收。当检测波长为215nm时，检测灵敏度较280nm时高4倍，因此，选择215nm作为检测波长。

(3)以甲醇-0.02mol/L乙酸钠溶液(9+91)和乙腈-水(10+90)作流动相时分离效果和峰形最好，由于乙腈的毒性较大，故采用前者作流动相。

三、保健食品中芦荟苷检验

(一)概述

1．主要来源芦荟苷(aloin)是百合科植物库拉索芦荟、好望角芦荟、斑纹芦荟的提取物，是芦荟中的主要生物活性成分之一，是羟基蒽醌与糖结合而成的一类羟基蒽醌衍生物。

2．理化性质芦荟苷为黄色或淡黄色结晶粉末，略带沉香气味、味苦，易溶于吡啶、冰醋酸、甲酸、丙酮以及乙醇等溶剂中。

3．保健功能芦荟苷可以杀菌、消炎解毒、促进伤口愈合；还具有泻下通便、清肝泻热的作用；同时对降低血压和血液黏度、软化血管有一定的促进作用；体外实验显示，芦荟苷对不同肿瘤细胞具有一定的杀伤作用。

4．分析方法芦荟苷的测定方法有分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、荧光分光光度法及毛细管电泳法等。其中高效液相色谱法是目前我国“保健食品检验与评价技术规范”推荐方法。

(二)高效液相色谱法

1．原理保健食品中的芦荟苷用甲醇-水超声波提取，经滤膜过滤后，以甲醇-水为流动相，用C₁₈柱分离，紫外检测器于293nm波长处检测，以保留时间定性，峰面积标准曲线法定量。

2．分析步骤

(1)样品处理：准确称取适量粉碎、混匀的样品，用流动相溶解，经超声波提取10分钟，用流动相定容，离心，取上清液经0.45 um滤膜过滤；液体样品用流动相稀释、混匀后，过滤，供色谱分析用。

(2)测定：色谱条件为C₁₈色谱柱(250mm×4.6mm, 5um)；柱温：40℃；紫外检测器：检测波长293nm；流动相：甲醇-水(55+45)；流速：1.0ml/min；进样量：10ul。

3．方法说明本方法适用于芦荟胶囊、片剂、汁等保健食品中芦荟苷的测定，本方法的最低检出量为10ng。

文章来源：《食品理化检验》

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