北京普天同创生物科技有限公司
蓝一爱农(lane—Eynon)法是国际上常用的还原糖的标准分析方法,我国制定的标准直接滴定法就是以此方法为基础改良的,此法广泛应用于科研、生产中糖的定量,其实验原理同直接滴定法。
1.样品处理
同直接滴定法。
2.样液预测
取费林试剂甲液、乙液各5.00mL于250mL锥形瓶中,从滴定管中加入样液约15ml,把锥形瓶放在石棉网上加热使其在2min内沸腾,维持沸腾2min,加入3滴次甲基蓝(如蓝色立即消失,表明糖液浓度太高,应适当增大稀释倍数后再预测),继续滴加样液(滴加速度控制在使糖液维持沸腾状态)至溶液蓝色刚好褪去为终点,继续滴加应控制在1min内完成,记录样液消耗总量(包括预先放入的15mL样液)。
3.样液的测定
吸取费林试剂甲液、乙液各5.OOmL于250mL锥形瓶中,预先从滴定管中加入比预测时所消耗的样液总量少1mL的样液,加热锥形瓶使之在2min内至沸,维持沸腾2min,加入3滴次甲基蓝指示剂,再以0.5滴/s的速度继续滴加样液,直至蓝色褪去即为终点,续滴工作应控制在1min内完成,记录样液消耗总量。
4.结果计算
X=F/m*V1/V*100*100
式中 X——试样中还原糖含量,g/100g;
V1——滴定时消耗样液ml;
V——样液总量,mL;
m——样品质量,g;
F——还原糖因数,即与10mL费林试剂(甲液、乙液各5mL)相当的还原糖量,mg。
5.试剂
①费林试剂(碱性酒石酸铜)甲液:同高锰酸钾滴定法。
②费林试剂乙液:同高锰酸钾滴定法。
③其他试剂同直接滴定法。
6.仪器
①酸式滴定管。
②可调电炉。
7.注意事项
①本法测定结果用哪种还原糖表示,就应该用哪种还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液;或用蓝一爱农法专用的“还原糖因数表”查得。
②如果是测定加糖乳制品,蔗糖会使测定结果偏高,故当蔗糖与乳糖的含量比超过3:1时,要加以校正。
③本法对操作条件要求严格,操作过程注意事项同直接滴定法。
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