一.荧光检测器

荧光检测器(FD)是利用某些溶质在受紫外线激发后，能发射可见光(荧光)的性质来进行检测的。它是一种具有高灵敏度和高选择性的检测器。对不产生荧光的物质，可使其与荧光试剂反应，制成可发生荧光的衍生物再进行测定。

图9-31是直角型荧光检测器的光路图，其激发光光路和荧光发射光路相互垂直。激发光光源常用氙灯，可发射250～600nm连续波长的强激发光。光源发出的光经透镜、激发单色器后，分离出具有确定波长的激发光，聚焦在流通池上，流通池中的溶质受激发后产生荧光。为避免激发光的干扰，只测量与激发光成90^o方向的荧光，此荧光强度与产生荧光物质的浓度成正比。此荧光通过透镜聚光，再经发射单色器，选择出所需检测的波长，聚焦在光电倍增管上，将光能转变成电信号，再经放大，送入微处理机。

图9-31  荧光检测器光路图
1-氙灯；2,6-透镜；3-反射镜；4-激发单色器；5-样品流通池；
7-发射单色器；8-光电倍增管；9-光二极管(UV吸收检测)

荧光检测器的灵敏度比紫外吸收检测器高100倍，当要对痕量组分进行选择性检测时，它是一种有力的检测工具。但它的线性范围较窄，不宜作为一般的检测器来使用，可用于梯度洗脱。测定中不能使用可猝灭、抑制或吸收荧光的溶剂作流动相。对不能直接产生荧光的物质，要使用色谱柱后衍生技术，操作比较复杂。此检测器现已在生物化工、临床医学检验、食品检验、环境监测中获得广泛的应用。

二.蒸发光散射检测器

在高效液相色谱分析中，人们一直希望能有一台像FID那样的通用型质量检测器，它能对各种物质均有响应，且响应因子基本一致，它的检测不依赖于样品分子中的官能团，且可用于梯度洗脱。目前最能接近满足这些要求的就是蒸发光散射检测器(ELSD)。

图9-32为蒸发光散射检测器的工作原理示意图。样品组分从色谱柱后流出，进入检测器后，经历了雾化、流动相蒸发和激光束检测三个步骤。

图9-32  蒸发光散射检测器的工作原理示意图

在蒸发光散射检测器中，色谱柱后流出物在通向检测器途中，被高速载气(N₂)喷成雾状液滴。在受温度控制的蒸发漂移管中，流动相不断蒸发，溶质形成不挥发的微小颗粒，被载气载带通过检测系统。检测系统由一个激光光源和一个光二极管检测器构成。在检测室中，光被散射的程度取决于检测室中溶质颗粒的大小和数量。粒子的数量取决于流动相的性质及喷雾气体和流动相的流速。当流动相和喷雾气体的流速恒定时，散射光的强度仅取决于溶质的浓度。此检测器可用于梯度洗脱，且响应值仅与光束中溶质颗粒的大小和数量有关，而与溶质的化学组成无关。

样品颗粒通过漂移管流动相蒸发后，进入流动池，受到由激光二极管发射的670nm激光束的照射，其散射光被硅晶体光电二极管检测产生电信号，电信号的强弱取决于进入流动池中样品颗粒的大小和数量，不受样品分子含有的官能团和光学特性的影响。

蒸发光散射检测器在雾化过程通入的雾化气体N₂的流量可以调节，在非运行情况下，气体流量可以关闭以减小消耗量，其内置的过压释放阀可在溶剂压力过高时自动卸压，以保护色谱柱和系统的其它部件。由于在漂移管中流动相的蒸发使ELSD是唯一在检测前去除流动相的检测器，从而消除了溶剂峰对基线的扰动，而获得稳定的基线，并且扩大了对流动相组分的选择范围。它可以高灵敏度准确地检测碳水化合物、表面活性剂、聚合物、药物、脂肪酸、油脂、天然产物(中草药)等多种样品。