高效液相色谱法(high performance liquid chromatography，HPLC)是基于流动相中的各组分与固定相发生作用的强弱不同以及在固定相中滞留时间不同的原理进行分离分析的方法。它是在20世纪60年代末，以经典液相色谱法为基础，引入了气相色谱的理论与实验方法而发展起来的。HPLC与经典液相色潜法的主要区别是流动相改为高压输送、采用高效固定相、实行在线检测等。HPLC具有分离效能高、分析速度快及应用范围广等特点，所以HPLC又被称为高速液相色谱法(high speed LC，SPLC)、高压液相色谱法(high pressure LC，HPLC)和高分辨液相色谱法(high resolution LC，HRLC)。当前，色谱工作者普遍采用高效液相色谱法(high performance LC，HPLC)的名称，因为它反映了该法高柱效、高灵敏度、高选择性的特点。

    关于HPLC的分类，有不同的分类依据。依据固定相的状态可分为液液色谱法(1iquid-liquid chromatographyr，LLC)和液固色谱法(1iquid-so1id chromatography，LSC)两大类。LLC是指流动相与固定相都是液体的色谱法。它是依据样品组分溶入固定相与流动相达到平衡后分配系数的差别来进行分离的，全称为液液分配色谱法(1iquid-liquid partition chromatography，LLPC)，简称液液色谱法。LSC是流动相为液体，固定相为固体吸附剂，依据样品组分吸附作用的不同而进行分离的色谱法，全称为液固吸附色谱法(1iquid-solid adsorption chromatography，LSAC)，简称液固色谱法。

    根据分离机制的不同，HPLc可以分为液液分配色谱法(LLPC)、液固吸附色谱法(LSAC)、离子交换色谱法(ion-exchange chromatography，IEC)、离子对色谱法(ion pair chromatography，IPC)、离子色谱法(ion chromatography，IC)和空间排阻色谱法(steric exclusion chromatography，SEC)等。其中，前两种色谱法在前面已经介绍了，下面仅对后面几种色谱法进行简要的叙述。

    离子交换色谱法(IEC)是以离子交换剂为固定相，以缓冲溶液为流动相，借助样品中电离组分对离子交换剂亲和力的不同，达到分离离子型或可离子化的化合物的目的。IEC中常用的离子交换剂有以交联聚苯乙烯为基体的离子交换树脂和以硅胶为基体的键合离子交换剂。流动相为含水的缓冲溶液，主要用于分离离子或可离解的化合物，如无机离子、有机酸、有机碱、氨基酸、核酸和蛋白质等。

    离子对色谱法(IPC)是在固定相上涂渍或在流动相中加入与溶质分子电荷相反的离子对试剂，来分离离子型或可离子化的化合物的方法。IPC又可分为正相IPC和反相IPC，目前广泛应用的是后者。反相IPC是把离子对试剂(如烷基铵类、烷基磺酸类)加至极性流动相中，被分析的样品离子在流动相中与离子对试剂(反离子)生成不带电荷的中性离子对，从而增加了样品离子在非极性固定相中的溶解度，使分配系数增加，改善分离效果。IPC适用于有机酸、碱、盐以及用IEC无法分离的离子和非离子混合物的分离。

    离子色谱法(IC)是20世纪70年代初在IEC基础上发展的一种分离方法。它以离子交换树脂为固定相，电解质溶液为流动相，电导检测器为通用检测器，主要对无机离子样品进行分析。IC可分为两种类型，一种是抑制型IC(双柱IC)，另一种是非抑制型IC(单柱IC)。前者是在分离柱和检测器之间串联一个抑制柱，以消除洗脱液本底电导的影响，从而实现对多种无机离子的分析；后者用交换容量更低的离子交换树脂为分离柱的填料，使用低浓度、电导率更低的洗脱液，样品离子经分离柱分离后直接进入电导检测器检测，不需使用抑制柱。

    空间排阻色谱法(SEC)是以多孔凝胶为固定相，依据凝胶空隙孔径大小与分子(高分子)

体积间的相对关系而实现分离的色谱法。根据流动相的不同分为两类，当流动相为水溶液时，称为凝胶过滤色谱；当流动相为有机溶剂时，称为凝胶渗透色谱。SEC的分离机理类似于分子筛效应，它是按分离组分的分子尺寸与凝胶的孔径大小之问的相对关系来分离待测组分的，常用于测定一些高聚物(如多糖)的分子量分布。

根据流动相的压强(柱压)不同，可将高效液相色谱法分为HPLC和超高效液相色谱法(ultra high performance 1iquid chromatography，UPLC)两大类。UPLC是本世纪才兴起的液相色谱技术，采用小粒径(1.7μm)、窄分布的固定相及高压强的流动相，压强可高达一般液相色谱仪的2.5倍(103MPa)，不但可缩短分析时间、降低柱体积与死体积，并能大幅提高色谱柱的分离分析性能。