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细胞计数法

发布时间:2017-03-09 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:691

细胞计数法是用血细胞计数板计数细胞数目,以调整接种细胞的浓度和测定细胞的增殖速度。首先取待测的细胞悬液0.1 ml加Hanks液0.9m1,混匀后,向盖玻片和血细胞计数板之间注入稀释的细胞悬液,按白细胞计数法,于低倍镜下计数4角的4个大方格内的细胞(图2-2)。每个大方格中的细胞密度以20~50个为宜,如果细胞密度太大,要稀释后再次计数,以提高细胞计数的精确度。计数过程中,对大方格的边缘压线细胞按数上不数下,数左不数右的原则进行计数。计数时,二次重复计算误差不应超过10%。细胞浓度按下列公式计算:

细胞计数后可调整细胞的接种浓度,一般在105~106范围内。在严格的实验设计与操作中,应根据计数结果,稀释细胞悬液的浓度进行接种。但在买际操作中,有经验的人常根据制备细胞的种类和细胞悬液的透明度等进行判断,因为这些人已经在先前的实验中掌握了105和106的悬液透明度。

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