一、实训目的

1．掌握几种抗生素的主要理化性质、反应原理及在定性鉴别中的应用；

2．理解抗生素药物结构与性质的关系；

3．学会应用药物的理化性质进行药物定性鉴别的方法和基本操作技术；

4．了解影响抗生素稳定性的因素。

二、实训原理

青霉素钠（钾）具有钠、钾盐结构，具有火焰反应；青霉素钠（钾）水溶性好，但在酸性条件下不稳定，易发生水解并进行分子内重排生成青霉二酸，该化合物为不溶于水的白色沉淀，但可溶于有机溶剂。

硫酸链霉素在碱性条件下苷键破裂水解成链霉胍和链霉糖。链霉糖在碱性条件下缩合重排为麦芽酚；与三价铁离子形成紫红色配合物。链霉胍可与8-羟基喹啉和次溴酸反应显橙红色。

硫酸庆大霉素与链霉素一样，具有氨基糖苷结构，具有羟基胺类和a-氨基酸的性质，可与茚三酮生成蓝紫色缩合物。

红霉素大环内酯结构中的内酯键和苷键遇酸水解断裂生成有色物。

氯霉素性质稳定，耐热，在中性或微酸性（(pH4.5-7.5)的水溶液中较稳定，但强酸、强碱条件下仍可水解得到有色物。

氯霉素本身为含不解离性氯的化合物，在氢氧化钾醇溶液中加热，氯霉素分子中不解离的氯转化为无机氯化物，使其呈氯离子的鉴别反应。

氯霉素分子中的硝基经氯化钙和锌粉还原成经胺衍生物，在醋酸钠存在下和苯甲酰氯反应生成酰化物，该化合物在弱酸性溶液中和三价铁离子生成紫红色配合物。

三、实训器材

1．仪器

铂丝、试管、研钵、吸管、烧杯、酒精灯、单口圆底烧瓶、玻璃空气冷凝器。

2．药品

青霉素钠（钾）、硫酸链霉素、硫酸庆大霉素、红霉素、氯霉素。

3．试剂

乙醇、三氯化铁试液、稀盐酸、乙醚、次溴酸钠试液、氯化钙溶液、盐酸、氯化钡试液、硝酸银试液、氨试液、氯仿、苯甲酰氯、无水吡啶、丙酮、醋酸乙酯、高锰酸钾、硫酸、硝酸、0.4％氢氧化钠溶液、酸性硫酸铁铵试液、锌粉、碘化钾一淀粉试纸、乙醇制氢氧化钾试液、0.1％8-羟基喹啉乙醇液、0.100茚三酮。

四、实训指导

1．青霉素钠（钾）

(1）取青霉素钠（钾）约0.1g，加水5mL溶解后，加稀盐酸2滴，即生成白色沉淀，此沉淀能在乙醇、氯仿、醋酸乙酯、乙醚或过量盐酸中溶解。

(2)将铂丝用盐酸湿润后，蘸取少量药品，在无色火焰上燃烧，钠盐显鲜黄色火焰，钾盐显紫色火焰。

2．硫酸链霉素

(1)取硫酸链霉素约0.25g，加水2mL振摇溶解后，加氢氧化钠试液2.5mL与0.1008-羟基喹啉的乙醇溶液1mL，放冷至约150C，加次嗅酸钠试液3滴，即显橙红色。

(2)取硫酸链霉素约0.25g，加水2mL溶解后，加氢氧化钠试液0.3mL，置水浴上加热5min，加硫酸铁铵溶液（取硫酸铁铵6.1g，加0.5mo1/L的硫酸液5mL，使溶解）0.5mL，即显紫红色。

(3)取硫酸链霉素约0.25g，加蒸馏水2mL溶解后，加氯化钡试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。

3．硫酸庆大霉素

取硫酸庆大霉素约0.2g，加水1mL溶解后，加0.1%茚三酮的水饱和正丁醇溶液1mL与吡啶0.5mL，在水浴中加热5min，即显紫蓝色。

4．红霉素

(1）取红霉素0.25g，加硫酸2mL，缓缓摇匀，即显红棕色。

(2)取红霉素0.25g，加丙酮2mL振摇溶解后，加盐酸2mL即显橙黄色，渐变为紫红色，再加氯仿2mL振摇，氯仿层应显紫色。

5.氯霉素

(1）取氯霉素0.1g，加50％乙醇溶液1mL溶解后，加1%氯化钙溶液3mg与锌粉50mg，置水浴上加热10min，放冷，倾出上清液，加苯甲酰氯2滴，迅速强力振摇lmin,加氯化铁试液0.5mL与氯仿2mL，水层显紫红色。如按同一方法不加锌粉试验，应不显紫红色。

(2）取氯霉素0.5g，加氢氧化钾乙醇溶液2mL，使其溶解，用带空气冷凝器的单口圆底烧瓶，在水浴上加热15-20min，放冷。加稀硝酸中和至强酸性后，过滤，将滤液分两份。其一，加1滴稀硝酸，应无沉淀生成，供以下备用；其二，加硝酸银试液，即产生白色凝乳状沉淀。沉淀能溶于氨试液，不溶于硝酸。取上述供试液1mL，加稀硫酸使呈酸性，加高锰酸钾固体数粒，加热即放出氯气，能使湿碘化钾一淀粉试纸显蓝色。

五、注意事项

1．青霉素钠（钾）盐有引湿性，遇酸、碱、氧化剂等分解变质，故应在实验使用前开封使用。

2．所用试液若为注射剂（液）可直接使用，若为片剂，应先进行处理，并用研钵研细后，取适量细粉使用。

3.氯霉素的鉴别实验中所用苯甲酰氯有毒，只需12滴即可，且应安排在毒气柜中操作。

4．青霉素钠（钾）的实验应尽量安排在最后进行，防止个别学生对青霉素有过敏反应。