(1) 卵白蛋白（Sigma-Aldrich )是一种含G1cNAc末端修饰的蛋白，用于CTD 110. 6免疫印迹阴性对照（100ng), sWGA免疫印迹(100ng）及半乳糖转移酶标记（2. 0 wg）的阳性对照。

(2) BSA-GlcNAc ( Sigma-Aldrich）含G1cNAc残基，用作CTD110.6和sWGA免疫印迹（1-5ng）的阳性对照。

(3) 20-30 μg胞质蛋白，胞核蛋白或总细胞提取物足够用于检测。

(4）封闭时，高浓度Tween-20可用牛奶或BSA替代。

(5) 抗体经常会与预染Marker发生交叉反应。

(6) 半乳糖转移酶标记可与免疫沉淀同时进行。但是，免疫球蛋白含大量会被优先标记的具有G1cNAc末端的N-连接糖基。所以，先标记细胞裂解液，再沉淀目的蛋白。

(7）sWGA-HRP可在PBS中（1. 0mg/ml, pH 7.4），-20℃贮存一年以上。

(8) 不建议用丙酮，因为丙酮可以使游离G1cNAc沉淀。

(9）半乳糖转移酶在含5. 0mmol/L DTT、 0. 5mol/L NaCl、2%（V/V) Triton X-100、 2% (V/V) NP-40，及1. 0mol/L尿素的溶液中仍有活性。

(10）加入5’-AMP可以抑制磷酸二酯酶活性，而磷酸二酯酶会竞争抑制标记实验。

(11) 游离UDP也是抑制剂，如果实验需要完全的GlcNA。标记，可以用牛小肠碱性磷酸酶降解UDP。

(12）如果实验需要完全的G1cNAc标记，需用未标记UDP-半乳糖及新鲜半乳糖转移酶。

(13）通常使用葡聚糖凝胶G 50分子筛层析来对样品进行除盐。但也可使用三氯乙酸沉淀等其他层析方法。样品和缓冲液中的其他的载体蛋白如BSA (67kD左右），细胞色素C (12. 5kD左右）等，因为非特异的蛋白吸附作用，会减少蛋白丢失量。

(14) 肽N-糖苷酶F不同于内切糖苷酶F，只裂解部分N-连接糖基。另外， PNGase F不会裂解含al-3核心的岩藻糖或者位于N端或C端的N-连接糖基。

(15）经肽N-糖苷酶F处理后，卵清蛋白（含1个N-连接糖基化位点）在SDS-聚丙烯酰胺凝胶（10% -12%）上的位置会上升数个kD，这种变化在7.5％的胶上很难检测到。

(16）蛋白样品中可加蛋白酶抑制剂混合物（PIC)。

(17) PNGase F可被SDS抑制，反应混合物中必须加入NP-40。