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培养基 | 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,氯化钠:10.0,琼脂:15.0,pH:7.0±0.2(25℃) |
传代方法 | 1.大肠杆菌DH10B感受态细胞放置冰中融化 (或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅 速插入冰中) ,加入目的 DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀,冰上静置 25 分钟。 2.42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰上并静置 2 分钟,晃动会降低转化效率。 3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基LB,混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。 4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。 5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少17h。 |
生长条件 | 37℃;18-24h;好氧 |
存储条件 | -80℃ |
安全等级 | 0 |
共享方式 | 公益性共享 |
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