大肠克隆菌ET12567(pUZ8002) 化学感受态细胞BNCC373750 质粒|普天同创

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ET12567(pUZ8002) Chemically Competent Cell

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大肠克隆菌ET12567(pUZ8002) 化学感受态细胞基本信息

培养基	酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，氯化钠：10.0，琼脂：15.0，pH：7.0±0.2（25℃）
传代方法	1.大肠克隆菌ET12567(pUZ8002) 感受态细胞放置冰中融化 (或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中) ，加入目的 DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。 2.42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。 3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基LB，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。 4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上（培养时需要加入25 μg/mL氯霉素和25 μg/mL卡那霉素以维持细胞内pUZ8002伴侣质粒的存在）。 5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少17h。
生长条件	37℃；18-24h；好氧
存储条件	-80℃
安全等级	0
共享方式	公益性共享