pET28a-Cas9-CysBNCC358530 质粒|普天同创

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pET28a-Cas9-Cys

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pET28a-Cas9-Cys基本信息

培养基	酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃)
传代方法	1.溶解：收到质粒干粉后，请加入 20μl 无菌水至管底，溶解质粒，室温静置 1min； 2.混合（吸附质粒）： 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀，冰上放置 30min； 3.热激导入： 42℃静置 90s； 4.收缩膜孔：冰浴 2min； 5.修复培养：毎管加 800µl LB 液体培养基，37 ℃培养 1h 150 r/min； 6.筛选培养：将适当体积（100 µl）的复苏细胞，涂布在相应抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（琼脂面务必干燥后），倒置培养 12-16h，出现菌落。 7.提取：挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中，震荡培养 12-16h，根据试验需要提取质粒。
生长条件	LB +卡那霉素，37℃（克隆菌株DH5α，4308bp）
存储条件	2-8℃
安全等级	0
应用领域	载体宿主：大肠杆菌，载体用途：未知，基因种属：未知，基因类型：Cas9，原核抗性：Kan，荧光蛋白：未知。
共享方式	公益性共享