北京普天同创生物科技有限公司
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培养基 | 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃) |
传代方法 | ①溶解:向质粒干粉中加入20μL无菌水进行溶解,室温静置1min; ②混合:取50μl 感受态细胞与10μl 质粒 DNA 混匀,冰上放置 30min; ③热激导入:42℃静置 90s; ④收缩膜孔:冰浴 2min; ⑤修复培养:毎管加 800μl 液体培养基,37 ℃摇床培养1h(150 r/min); ⑥筛选培养:将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落; ⑦提取:挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒 |
生长条件 | 37℃;18-24h;好氧 |
存储条件 | -20℃ |
安全等级 | 1 |
应用领域 | 质粒载体 |
共享方式 | 公益性共享 |
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