北京普天同创生物科技有限公司
培养基 | 98%EMEM+2%FBS |
传代方法 | ①宿主细胞MRC-5培养
将冻存细胞复苏至T25瓶中培养,在培养温度37℃、气体环境5%CO2+95%空气的培养条件下培养3天密度可达到80%,此时接种病毒。 ②病毒接种 将人腺病毒2型置于37℃水浴锅中溶解。将密度达到80%的MRC-5去除细胞培养基后,用PBS轻轻润洗1-2遍以去除残留培养基。将1ml病毒液接种到宿主细胞中,在37℃、5%CO2+95%空气的条件下吸附1-2小时,每15分钟轻轻摇动一次T25瓶,使病毒分布更加均匀。 ③病毒培养 吸附结束后,通过添加6-8mL病毒生长培养基结束吸附。置于培养箱中进行培养2-3天。期间需要每日观察,当宿主细胞全部产生病变后开始收集病毒。 ④病毒液收集 收获时将细胞反复冻融2次,然后用0.22μm孔径过滤器收集病毒。 |
生长条件 | 培养温度37℃;气体环境5%CO2+95%空气;2-5天; |
存储条件 | 液氮 |
安全等级 | 2 |
形态 | 细胞皱缩变圆脱落 |
分离基物 | 该菌株于 1953 年从一名患有肥大扁桃体和腺样体的 7 岁人类女性中分离出来 |
共享方式 | 公益性共享 |
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