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培养基 | 90%DMEM-H+10%FBS |
传代方法 | 复苏步骤:①冻存管从液氮或-80℃中取出放入PE手套中,迅速没入37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以1分钟内全部溶解为宜;②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9ml 完全培养基的离心管内,1000-1200rpm/min离心5分钟,弃去上清液,用1-2mL完全培养基重悬细胞。③然后将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中,放入培养箱培养。 细胞传代:①将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续消化),直接吸掉胰酶,加入5-6毫升完全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。④注意培养基pH值变化和细胞密度,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%-90%时,重复传代操作或者冻存。 |
生长条件 | 培养温度37℃;气体环境5%CO2+95%空气; |
生长特性 | 贴壁生长 |
存储条件 | 液氮 |
安全等级 | 1 |
形态 | 成纤维细胞样,梭形 |
分离基物 | 胚胎 |
应用领域 | 该系产生了一种可以感染小鼠细胞的载体。Psi2 DAP 细胞产生编码人胎盘碱性磷酸酶基因和新霉素抗性基因的载体。该细胞系通过插入重组逆转录病毒基因组 (DAP) 衍生自 Psi2 细胞。用 Psi2 DAP 细胞产生的载体感染的细胞表达组织化学可检测的碱性磷酸酶,可用作跟踪其体内命运的标记。细胞可产生辅助病毒。 |
共享方式 | 公益性共享 |
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