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培养基 | EMEM完全培养基(CM21-1):85%EMEM+15%FBS |
传代方法 | 复苏步骤:①冻存管从液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速没入 37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以 1 分钟内全部 溶解为宜;②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有 9ml 完全培养基的离心管内,1000-1200rpm/min 离心 5 分钟,弃去 上清液,用 1-2mL 完全培养基重悬细胞。③然后将细胞悬液加入到含有 5-6mL 完全培养基的 T25 瓶中,放入培养箱培养。 细胞传代:①将旧培养液吸除,PBS 清洗两遍后,加入 1-2mL 胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②镜下观察消化情况, 在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续 消化),直接吸掉胰酶,加入 5-6 毫升完全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。③将细胞悬液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。④注意培养基 pH 值变化和细胞密度,定期换 液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%-90%时,重复传代操作或者冻存。 |
生长条件 | 培养温度37℃;气体环境5%CO2+95%空气; |
生长特性 | 贴壁生长 |
存储条件 | 液氮 |
类型 | 嗜碱性细胞白血病细胞 |
安全等级 | 1 |
形态 | 成纤维细胞样,短梭形,边缘不规则,单层贴壁生长 |
分离基物 | RBL-2H3是1978年国立牙科研究所的免疫学实验室从Wistar大鼠保持肿瘤状态的嗜碱性细胞中分离和克隆出来的嗜碱性白血病细胞株。 |
应用领域 | 这些细胞具有高亲和力的IgE受体。 通过集聚这些受体或与钙离子载体协同作用可以激活它们分泌组胺及其他递质。 这株细胞广泛地用于研究肥大细胞FcERI和分泌的生化途径。 RBL-2H3细胞是研究FcERI结构的模型。 它们广泛地用于研究细胞分泌的不同方面,包括细胞内钙浓度改变、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。 虽然几乎所有批号的FBS都支持细胞的生长,但在某些批号中FcERI集聚后脱粒化得更好。 另一株大鼠嗜碱性细胞株(RBL,ATCC CRL-1378)不会脱粒化。 |
共享方式 | 公益性共享 |
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