转基因 BT63 水稻种子粉基体标准物质
Genetically Modified BT63 Rice Seed Powder
转基因 BT63 水稻种子粉系列基体标准物质可用于转基因水稻作物、食品和饲料等的转基因成 分定量检测、安全评价、实验室测量质量控制及技术仲裁等。
一、 样品制备
本系列标准物质是将经鉴定纯度大于 99.9%的非转基因明恢 63 水稻种子和转基因 BT63 水稻种 子冷冻研磨成粉末,并经粒径和水分测定合格后,按照质量分数为 0%、0.5%、1%、2%、5%的比例 将转基因水稻 BT63 种子粉末和非转基因明恢 63 水稻种子粉末进行充分混匀后制成。经均匀性初检 合格后,在洁净环境条件下分装。
二、溯源性及定值方法
本系列标准物质采用重量法将转基因水稻种子粉和非转基因水稻种子粉按照一定质量配比得到 的质量分数作为标准值。采用数字 PCR 法分别对插入水稻基因组中的外源基因拷贝数与水稻基因组 中的内标准基因的拷贝数进行测量,得出的拷贝数分数作为参考值。本系列标准物质通过使用满足 计量学特性要求的制备方法、测量方法和计量器具,保证其量值溯源性。
三、特性量值及不确定度
编 号
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名 称
|
标准值
(质量分数)
(×10-2)
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扩展不确定度
(×10-2)
(k=2)
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参考值
(拷贝分数)
(×10-2)
|
扩展不确定度
(×10-2)
(k=2)
|
GBW10070
|
转基因 BT63 水稻种子粉基体标准物质
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0.50
|
0.04
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0.51
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0.07
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GBW10071
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转基因 BT63 水稻种子粉基体标准物质
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1.01
|
0.07
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1.00
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0.13
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GBW10072
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转基因 BT63 水稻种子粉基体标准物质
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2.01
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0.11
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1.91
|
0.25
|
GBW10073
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转基因 BT63 水稻种子粉基体标准物质
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5.03
|
0.35
|
4.31
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0.58
|
——
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空白
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<0.08
|
——
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0.0014
|
0.0015
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标准值不确定度评定考虑了定值方法、水分测定、均匀性、稳定性引入的不确定度分量。
四、均匀性及稳定性
按照 JJF1343-2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》,采用纳米金标记和中子活化分析 方法对该标准物质进行均匀性检验研究,最小取样量 100mg,结果表明均匀性良好。按照先密后疏 的原则采用数字 PCR 法对该标准物质进行稳定性考察研究,标准值无方向性变化并通过平均值一致 性检验,表明稳定性良好。
本标准物质自定值日期起,有效期为 7 年,研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性,有 效期内如发现量值变化,将及时通知用户。
五、包装、储存及使用
1.包装与储存:本标准物质采用棕色玻璃西林瓶包装,每瓶 1g;置于 4℃冰箱中冷藏保存。
2.使用:使用前应先从冰箱内取出,平衡至室温后再打开瓶盖使用。样品开封后,应尽快恢复 密封状态。 建议用 Promega FF3750 Wizard® Magnetic DNA Purification System for Food (美国普洛麦格公 司)试剂盒提取水稻种子粉末基因组 DNA,再用荧光定量 PCR 进行检测,引物和探针序列[1, 2]详见 下表。 外源基因和内标准基因的引物及探针序列
基因名称
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引物或探针
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序列信息 (5’-3’)
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扩增片段长度
/(碱基)
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外源基因
BT
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上游引物
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AGAGACTGGTGATTTCAGCGGG
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120
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下游引物
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GCGTCCAGAAGGAAAAGGAATA
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探针
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FAM-ATCTGCCCCAGCACTCGTCCG-BHQ1
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内标准基因
RBE4
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上游引物
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GTTTTAGTTGGGTGAAAGCGGTT
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106
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下游引物
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CCTGTTAGTTCTTCCAATGCCCTTA
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探针
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FAM-AGTATCTATTCCCAACCAGA-MGBNFQ
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声明
1.本标准物质仅供实验室研究与分析测试工作使用。因用户使用或储存不当所引起的投诉,不予承担责任。
2.收到后请立即核对品种、数量和包装,相关赔偿只限于标准物质本身,不涉及其他任何损失。
3.仅对加盖“中国计量科学研究院标准物质专用章”的完整证书负责。请妥善保管此证书。
4.如需获得更多与应用有关的信息,请与技术咨询部门联系。
注:证书信息仅供参考,以产品附带证书为准。