在植物细胞组织培养实验中经常使用各种玻璃仪器和器皿。如果在实验中使用不清洁的器皿，则会由于污染物和杂质的存在而影响到培养的效果。因此，玻璃器皿的洗涤是实验的一个重要内容。一般情况下，附着在仪器上的污染物有尘土和其他不溶性物质，针对不同性质的污染物，可分别选用下列方法进行洗涤。

1．新购玻璃器皿

新购买的玻璃器皿表而常附有游离的碱性物质，先除去外层包装纸，在刷洗前先在水中浸泡2—4h，以便除去一些渣子、灰尘和某些可溶性物质。具体操作步骤如下：

对一些广口类的器皿如培养瓶等根据清洁程度，可用自来水冲洗。冲洗完后还比较脏，可直接用毛刷蘸取适量的肥皂水或0．5％的去污剂等普通洗涤剂反复刷洗器皿的内外壁，然后用自来水冲洗干净，再浸泡在1％～2％盐酸溶液中过夜(不可少于4h)，最后用蒸馏水洗2～3次即可备用。而对一些像容量瓶等长口大肚类的容器，属于难以用刷子清洗的特殊器皿，则需用刷子先将外表刷洗干净，然后将洗涤剂灌入其中约2／3(或浸泡到一个较大的容器中)，再盖上瓶盖用双手拿稳容量瓶上下前后反复猛烈晃动，使得器皿内的液体呈涡旋状运动，可冲洗干净器皿内的杂质，采用同样的操作方法再用稀盐酸、自来水冲洗干挣，最后用少量蒸馏水淋洗2—3次，倒置器皿流尽内壁的水即可备用。

对一些刻度移液管和试剂瓶中的吸管等细长且内径较小的器皿，使用前应洗至内壁不挂水珠，1mL以上的移液管用移液管专用刷子刷洗，0．1mL、0．2mL和0．5mL的移液管可用洗涤剂浸泡，必要时可以用超声清洗器清洗。一般洗涤液操作方法如下：先将移液管、吸管等玻璃管在洗涤液中浸泡适当的时间后，将尖端浸没在洗涤液中，用洗耳球对准移液管的粗端，配合合适的力度，用手来回反复地挤压洗耳球，使得洗涤液在管内快速往返运动，可清洗干净其中的杂质；之后采用同样的操作方法，将洗涤液分别换成自来水和蒸馏水清洗干净后尖端向下，倾斜放置在管架上，流尽管内的水即可备用。也可将玻璃器皿直接放入盛有洗涤剂的超声波清洗机中，浸泡合适的时间后，启动旋钮即可清洗干净洗涤物，再用自来水和蒸馏水冲洗干净备用。

上述器皿洗后，如内壁还有油污，则应倒尽残水，用重铬酸钾洗液浸洗。向容量瓶内倒入适量的重铬酸钾洗液，倾斜转动，使洗液充分润洗内壁，再倒回原洗液瓶中，用自来水冲洗干净后再用蒸馏水润洗2～3次备用。

2．用过的玻璃器皿

用过的玻璃器皿必须立即洗涤，应养成习惯。由于污垢的性质在当时是清楚的，用适当的方法进行洗涤是容易做到的。若时间久了，可能会增加洗涤的困难。洗涤的一般方法是用水、洗衣粉、去污粉刷洗。刷子是特制的，如瓶刷、烧杯刷等，但用腐蚀性洗液时则不用刷子。

(1)烧杯、锥形瓶、量简和培养皿等广口型器皿对一些广口型器皿，例如三角瓶(锥形瓶)、烧杯、量筒、试管、广口瓶、培养皿，甚至包括玻璃棒等，由于开口较大，适合于各种类型的刷子操作，因而在洗刷期间可配合使用刷子，具体洗刷方法如下；

①用自来水刷洗先将脏的玻璃器皿放在水槽中浸泡，用刷子除去瓶内残余的污物，用自来水冲洗一次然后浸泡入自来水中(对一些比较干净且无明显玷污的器皿，可直接浸泡入自来水中)2h左右，然后根据所洗器皿的形状选用合适的毛刷，如试管刷、烧杯刷、锥形瓶刷、滴定管刷等认真刷洗器皿，可基本除去器皿表面上的灰尘、可溶性物质以及一些不溶性物质。洗刷时，不能用秃顶的毛刷，也不能用力过猛，防止戳破仪器。

②用去污粉、皂液和合成洗涤剂清洗用毛刷蘸取适量去污粉、洗衣粉或合成洗涤剂刷洗内外表面，必要时可将洗液加大浓度或预先加热以提高效果，然后用自来水冲洗于净。这些洗涤剂可以洗去油脂或某些有机物。若仍洗涤不净时，可用热的碱液洗，再用自来水冲洗干净，一般的污渍采用该方法都能去除掉。

③用重铬酸钾等特殊洗涤剂清洗在上一步骤中，采用肥皂水或去污粉洗净的器皿内壁应不挂水珠，否则说明有玷污，则需进一步采用重铬酸钾洗液浸洗。洗液是浓硫酸和饱和重铬酸钾溶液的混合物。配制时将150g化学纯的重铬酸钾溶于适量的热水中，冷却后用粗滴管缓缓滴加工业用浓硫酸，边加边搅拌直到烧杯壁很烫，稍停顿一会儿，待散热后，再继续加入浓硫酸总虽约450mL即成。新配制的洗液为深褐色，有很强的氧化性和酸性。使用洗液时应避免引入大量的水和还原性物质(如福尔马林、酒精及某些有机物)，否则会因洗液冲稀或变绿而失效。洗液中浓硫酸易吸水，不用时应贮存于带磨口的玻璃细口瓶中。对一些广口型的器皿可直接倒入重铬酸钾洗液，配合相应的刷子小心地刷洗干净，可除去一切有机物质。

对一用过的试剂瓶等，在用自来水和肥皂水洗涤后，瓶壁内仍然残留有不溶性物质，也可采用特殊的试剂清洗。例如，用盐酸乙醇洗涤液或用适当的酸可洗去难溶的氢氧化物、硫化物等；当有胶状或焦油状有机污垢如用上述方法不能洗去时，可用丙酮、乙醚、苯浸泡，再用蒸馏水冲洗。用酸性硫酸亚铁溶液洗涤沾有MnO2污物的器皿，会收到更好的效果。

④用自来水和蒸馏水清洗在②和③洗涤后的各类器皿，先用自来水冲洗干净，最后用蒸馏水淋洗2～3次即可备用。洗干净的器皿应该是铮亮透明，内外壁水膜均一，不挂水珠，说明没有污迹存在。

(2)容量瓶、移液管、吸管类器皿这类器皿因其特殊的结构难以用刷子清洗内壁，洗涤操作步骤如下：

①用去污粉、皂液和合成洗涤剂清洗用过的移液管和吸管在使用前需要首先用去污粉、皂液或合成洗涤剂清洗，其具体操作步骤如同“新购玻璃器皿”的洗涤操作，在此不再赘述。

②用重铬酸钾洗液清洗在上一步中采用一般的去污粉或合成洗涤剂无法去除污渍的移液管，可进一步采用重铬酸钾洗液清洗，必要时可预先加热洗液，其氧化效果会更强，但是一定要先将器皿上的肥皂水等用自来水冲洗干净并晾干。具体步骤是先取一定量洗液倒入100mL烧杯中，然后用右手的拇指和中指拿住移液管的上管颈标线以上部位，使管下端伸入烧杯中的洗液，左手握住洗耳球使其出气口与移液管的上管口贴紧不漏气，用洗耳球从上端吸气，使烧杯中的洗液吸入管内，当洗液上升到一定的高度后，移开洗耳球，用右手食指迅速按住管口上端，静置几分钟；或者待洗液吸入管内后，用两手平端移液管并不断缓慢转动，直到洗涤液布满全管为止，最后管口尖端朝下松开食指，使重铬酸钾洗液流回烧杯中，待洗液流尽后，取出将管倒置使管上端未浸过的部分再浸入洗液中，浸泡片刻后取出液面，用过的洗液全部放回原瓶中。

重铬酸钾洗液具有很强的腐蚀性而且铬有毒性，用时必须特别小心，注意安全。洗涤移液管时，绝对不能用口吸，只能使用洗耳球吸取。洗液可反复使用，用过的洗液，应倒回原装瓶下次再用，绝不允许倒入水槽内。洗液经多次使用后，效力降低时，可加入适量的KMnO4粉末再生。

③用自来水和蒸馏水清洗用重铬酸钾洗液洗完后，再用自来水充分地冲洗内外壁至流出的水无色，且移液管的内壁应完全被水均匀润湿且不挂水珠，然后用蒸馏水洗2～3次即可，洗后的移液管应将其倾斜尖端向下，使水流尽。

如果有的玻璃器皿粘有凡士林、石蜡或胶布，其具体操作步骤如下：先用废纸擦去凡士林后，再用去油剂擦洗，最后用热肥皂水煮沸半小时，刷洗后并用自来水冲洗。若带有石蜡，则存玻璃器皿下垫几层废报纸，放入60～70℃的烘箱中，加热l～2h至溶化，用草纸反复擦几次除去部分石蜡，再将器皿浸泡入肥皂水中加热煮沸30min，刷洗后可彻底除去石蜡。器皿上若粘着有胶布或标签纸之类的附着物，可先用70%的酒精棉球擦数遍使酒精溶解精胶状物，再用洗衣粉溶液煮沸半小时，刷洗后用自来水冲洗干净即可。

石英和玻璃比色皿绝不可用强碱清洗，因为强碱会侵蚀抛光的比色皿。只能用洗液或1％～2％的去污剂浸泡，然后用自来水冲洗，若用一只绸布包裹的小棒或棉花球棒刷洗，效果会更好。清洗干净的比色皿内外壁应不挂水珠。

若用去污粉难以洗涤时，则可根据污垢的性质选用适当的洗液进行洗涤。如酸性(或碱性)的污垢可用碱性(或酸性)洗液洗涤；有机污垢用碱液或有机溶剂洗涤，但用腐蚀性洗液时则不能用刷子。

吸管类器皿的洗涤可采用超声波洗涤法，具体方法是在超声波清洗器中放入需要洗涤的仪器，再加入合适洗涤剂和水，接通电源，利用超声波能量和振动，就可把仪器清洗干净，既省时又方便。

若要重新利用曾装有污染组织或培养基的玻璃器皿，在清洗之前，应先不开盖把它们放入高压锅中灭菌，这样做可以把所有污染微生物杀死。即使带有污染物的培养容器是一次性消耗品，在把它们丢弃之前也应先进行高压灭菌，以尽量减少细菌和真菌在实验室中的扩散。如用过的玻璃器皿在管壁上或瓶壁上粘有干掉了的琼脂，也是在清洗之前，最好先将其放入高压锅中融化，倒掉再彻底清洗。

对于某些特殊污垢采用常规的方法不能除去时，则可通过化学反应将黏附在器壁上的物质转化为水溶性物质。几种常见污垢的处理方法见下表。