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利用植物细胞组织培养技术获得的材料,需要放存一定的温度、湿度、光照、营养条什下培养生长、发育和繁殖,这就必须要有一定的条件。常用的基本设备如下:
1.超净工作台
超净工作台主要是用以进行无菌操作。一般由鼓风机、滤板、操作台、紫外光灯和照明灯等部分组成。在小型鼓风机带动下,先让空气穿过一个粗过滤器,存这里把大部分空气尘埃先滤掉。然后再使空气穿过一个细致的高效过滤器,把大于0.3μm的颗粒包括细菌和真菌孢子等都滤掉,然后这种不带真菌和细菌的超净空气吹过台面上的整个工作区域,超净空气的流速为每分钟24~30m,这个气流速度足够防止因附近空气袭扰而引起的污染,这样的流速也不会妨碍酒精灯对器械的灼烧消毒,只要超净工作台不停地运转,在台面上即可保持一个完全无菌的环境,可保证无菌材料在接种过程中不受污染。在每次操作之前,要把实验材料和在操作中须使用的各种器械、药品等先放入台内,不要中途拿入;同时,台面上放置的东西也不宜太多,特别注意不要把东西迎面堆得太高,以致挡住气流。最后,在使用超净工作台时应注意安全,当台面上的酒精灯点燃以后,千万不要再喷洒酒精消毒台面,否则很容易引起火灾。根据风幕形成的方式,超净台可分为水平式和垂直式两种,它有单人式、双人式及三人式的,也有开放式和密封式的,目前这两种超净工作台我国都生产。
2.解剖镜
种类很多,可用于分离解剖微茎尖,可采用双筒解剖镜。
3.大型工作台
其高度应适合于站着工作。
4.药品柜
用于放置常用药品。
5.低温冰箱或普通冰箱
冰箱主要用于贮存培养基贮备液,某些酶和椰子汁,各种易变质、易分解的化学药品和植物材料等。
6.药物天平和电子分析天平
药物天平主要用于称取蔗糖、大量元素和琼脂等,称量精度为0.1g。电子分析天平用于称取微量元素、维牛素、激素等微鼍药品,精确度为0.0001g。
7.制蒸馏水或去离子水装置
水中还有无机和有机杂质,如不除去势必会影响培养效果。植物细胞组织培养中常使用蒸馏水和无离子水,蒸馏水多是采用硬质玻璃或金属蒸馏水器制成,无离子水则是用离子交换器制备,成本虽低,但不能去掉水中的有机成分。
8,电热磁力搅拌器
用以加速搅拌溶解化学药品,如各种化学物质、琼脂粉等。
9.恒温水浴锅或微波炉
以溶解琼脂或融化培养基、难溶解药品等。
10.可调式电炉或电饭锅
一般加热用,常与压力锅配合用于蒸汽消毒,电炉的功率为1500W或2000W,并配制铝锅。
11.酸度计
用于调节培养基或溶液的pH值,组织培养中培养基pH值是否准确很关键,因此配制时,需要用酸度计测定来调整。若元酸度计,也可使用精密pH值1.0~12.0的试纸代替。测量pH值时,待测液必须充分搅拌均匀。首次使用酸度计前,应调节温度到当时的室温,用标准液(pH7.0或pH4.0)校正后方能测定。如果培养基温度过高,测量时要调整pH计上的温度按钮使之和培养基温度相当,注意保护好玻璃电极,用后电极用蒸馏水冲洗干净,盖上极帽。
12.培养基分装设备
小型操作时可采用烧杯直接分装,大型实验室可采用医用“下口杯”作为分装工具,在其下段套上一段软胶管,加一弹簧止水夹,使用时非常合适。更大规模或要求较高效率时,可采用液体自动大量灌注设备。
13.高压灭菌锅
是组织培养中基本的设备之一,用于培养基、蒸馏水和接种器械的消毒灭菌等。目前有大型卧式、中型立式、小型手提。小规模实验室可选用小型手提高压灭菌锅是连续的大规模生产,则采用大型立式的或卧式的高压灭菌锅,通常以电作能源。一般在121℃,1.0~1.1kg/cm2下,保持15~40min即可。
14.恒温培养箱
用于少最植物材料的培养,其内有温度感受器,生化培养箱还配有光照装置图。
15.烘箱
烘箱主要用以烘干洗过的器皿和对玻璃器皿进行干热消毒。洗净后的玻璃器皿,如需要迅速干燥,可放在烘箱内烘干,温度80~100℃为宜。若需要干热灭菌,温度升高至160~180℃,持续1~3h即可。
16.吸气机或真空泵
用以辅助过滤灭菌。
17.低速台式离心机
用于沉淀细胞以便确定沉积细胞的总体积或清洗原生质体。一般转速为2000~4000r/min。
18.空调
用以保持培养室温度。
19.摇床或振荡器
植物细胞组织培养中有时要进行液体培养,为改善培养液体中的氧气状况,需要用到摇床或旋转培养机,用于悬浮培养和振荡培养。例如,细胞悬浮培养。摇床分水平往复式和回旋式两种,一般振速为l00r/mln左右。
20.血球计数器
用于细胞计数。
21.显微镜
用于观察细胞和组织。一般用双筒实体显微镜较多,用于剥取茎尖以及隔瓶观察内部植物组织生长情况。同时也还需要有生物显微镜、倒置显微镜等。
22.过滤除菌器
用于加热易失活和分解的物质的除菌,一般使用直径小于或等于0.45μm的滤膜。
23.电消毒设备
用于镊子、剪刀、接种针等金属类灭菌。
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