①仪器校正：测定重铬酸钾溶液的摩尔消光系数，以求出使用仪器的校正因素。准确称取25mg经干燥的重铬酸钾(基准级)，用硫酸(0.5+1000)溶解后并准确稀释至200mL，相当于c(K2Cr2O4)=0.0004mol/L。再吸取25mL此稀释液于50mL容量瓶中，加硫酸(0.5+1000)稀释至刻度，相当于0.0002mol/L溶液。再吸取25mL此稀释液于50mL容量瓶中，加硫酸(0.5+1000)稀释至刻度，相当于0.0001mol/L溶液。用1cm石英杯，在最大吸收峰的波长(接近350nm处)用硫酸(0.5+1000)作空白，测得以上三种不同浓度的摩尔溶液的吸光度，并按下式计算出以上三种浓度的摩尔消光系数的平均值。

式中E1——重铬酸钾溶液的摩尔消光系数

A——测得重铬酸钾溶液的吸光度

c——重铬酸钾溶液的浓度

再以此平均值与重铬酸钾的摩尔消光系数值3160比较，即求出使用仪器的校正因素。按下式进行计算：

式中f——使用仪器的校正因素

E——测得的重铬酸钾摩尔消光系数平均值

若f大于0.95或小于1.05，则使用仪器的校正因素可略而不计。

②黄曲霉毒素B1标准溶液的制备：准确称取1～1.2mg黄曲霉毒素B1标准品，先加入2mL乙腈溶解后，再用苯稀释至100mL，避光，于4℃冰箱保存。该标准溶液约为10ug/mL。用紫外分光光度计测此标准溶液的最大吸收峰的波长及该波长的吸光度值。按下式进行结果计算：

式中X——黄曲霉毒素B1标准溶液的浓度，ug/mL

A——测得的吸光度

f——使用仪器的校正因素

M_r——黄曲霉毒素B1的相对分子质量312

E₂——黄曲霉毒素B2在苯-乙腈混合液中的摩尔消光系数19800

根据计算，用苯-乙腈混合液调到标准溶液浓度恰为10.0ug/mL，并用分光光度计核对其浓度。

③纯度的测定：取5μL 10ug/mL黄曲霉毒素B1标准溶液，滴加于涂层厚度0.25mm的硅胶G薄层板上，用甲醇-三氯甲烷(4+96)与丙酮-三氯甲烷(8+92)展开剂展开，在紫外光灯下观察荧光的产生，必须符合以下条件：

a.在展开后，只有单一的荧光点，无其他杂质荧光点。

b.原点上没有任何残留的荧光物质。

(24)黄曲霉毒素B1标准使用液：准确吸取1mL标准溶液(10ug/mL)于10mL容量瓶中，加苯-乙腈混合液至刻度，混匀。此溶液每1mL相当于1.0ug黄曲霉毒素B1。吸取1.0mL此稀释液，置于5mL容量瓶中，加苯-乙腈混合液稀释至刻度，此溶液每1mL相当于0.2ug黄曲霉毒素B1。再吸取黄曲霉毒素B1标准溶液(0.2ug/mL)1.0mL置于5mL容量瓶中，加苯-乙腈混合液稀释至刻度。此溶液每1mL相当于0.04ug黄曲霉毒素B1。

(25)次氯酸钠溶液(清毒用)：取100g漂白粉，加入500mL水，搅拌均匀。另将80g工业用碳酸钠(Na₂CO₃·10H₂O)溶于500mL温水中，再将两液混合、搅拌，澄清后过滤。此滤液含次氯酸浓度约为25g/L。若用漂粉精制备，则碳酸钠的量可以加倍。所得溶液的浓度约为50g/L。污染的玻璃仪器用10g/L次氯酸钠溶液浸泡半天或用50g/L次氯酸钠溶液浸泡片刻后，即可达到去毒效果。

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文章来源：《食品理化检测技术》

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