四、 皂苷

供试品溶液的制备：称取样品粉末1g，加水10ml，在60℃的水浴上加热10分钟，滤过，滤液供作以下试验。

(一) 泡沫反应

皂苷水溶液振摇后能产生持久性泡沫(15分钟以上)。

(二) 三萜皂苷和甾体皂苷区别试验

取试管2支，各加入1ml滤液，一管内加入5%氢氧化钠溶液2ml，另一管内加入5%盐酸溶液2ml，将两管塞紧，用力振摇1分钟，观察两管出现的情况，如两管的泡沫高度相似，表明含有三萜皂苷，如含碱液试管比含酸液试管的泡沫高达数倍，则表明含有甾体皂苷。

(三) 醋酐-硫酸反应

将滤液溶解于醋酐中，加入醋酐-硫酸(1：20)数滴，能产生颜色变化，如为三萜皂苷，溶液可由黄色转变为红色、紫色或蓝色；而甾体皂苷在发生上述颜色变化后，最后呈现绿色。

(四) 三氯醋酸反应

将滤液滴在滤纸上，喷三氯醋酸试剂，加热，生成红色渐变紫色。甾体皂苷加热到60℃即发生变化；而三萜皂苷必须加热至100℃才显色。

(五) Ehrlich反应

称取样品粉末2g，加80%乙醇加热浸提，滤过，滤液蒸去乙醇，放冷，残渣加Ehrlich试剂，于105℃加热后，呋甾烷型甾体皂苷显红色，而其他甾体皂苷及三萜皂苷不显色。

(六) 香草醛-硫酸或高氯酸反应

该反应也是较为常用的皂苷显色反应。在使用芳香酸为显色剂的反应中，以香草醛最为普遍，因其显色灵敏，试剂空白溶液色浅，故常用作人参皂苷、甘草皂苷、柴胡皂苷等三萜皂苷的显色剂，也常用作甾体皂苷的显色剂。

五、强心苷类

供试液制备同黄酮类。

(一) 二硝基苯甲酸(Kedde)试验

取滤液1ml，加入二硝基苯甲酸试液3～4滴，溶液显红色或紫红色，提示试样中含有α，β-不饱和内酯。将滤液滴于滤纸上，喷洒上述试液，显紫红色。

(二) 碱性苦味酸(Baljet)试验

取滤液1ml，加入碱性苦味酸试液几滴，溶液显橙色或橙红色，提示试样中含有α，β-不饱和内酯。此反应有时发生较慢，需放置约15分钟后才能出现颜色。

(三) 亚硝基铁氰化钠(Legal)试验

取滤液1ml，在水浴上蒸干，加入0.3%亚硝酸铁氰化钠溶液1～2滴，溶液显红色，并逐渐消失，提示试样中含有α，β-不饱和内酯。

(四) 三氯化铁冰醋酸反应

取滤液2ml，水浴上蒸干，残渣加入0.5%三氯化铁的冰醋酸溶液2ml溶解，转移至试管内，沿管壁加入浓硫酸1ml，两液界面呈棕色，渐变为浅绿色，蓝色，最后冰醋酸层全部呈现蓝色，提示试样中含有2-脱氧糖。

六、 醌类及其苷类

供试液制备同黄酮类。

(一) 碱液试验

取滤液1ml，加入10%氢氧化钠溶液，显红色。加入少量30%过氧化氢液，加热后红色不退，加酸使成酸性时，则红色消失。

亦可将滤液滴于滤纸上，喷洒10%氢氧化钠溶液，显黄、橙、红色荧光。

(二) 醋酸镁试验

取滤液1ml，加入1%醋酸镁甲醇溶液3滴，显红色反应。亦可将滤液滴于滤纸上，喷洒0.5%醋酸镁甲醇溶液，90℃加热5分钟，呈红色或紫色斑点。

(三) 微量升华试验

取样品粉末少许，用微量升华法，有时可得结晶性蒽醌化合物的升华物，升华物加浓碱显红色。

七、内酯、香豆精及其苷类

供试液的制备同黄酮类。

(一) 异羟肟酸铁试验

内酯结构在碱性条件下开环后可与盐酸羟胺作用生成异羟肟酸，再与三氯化铁反应能生成紫红色的络合物异羟肟酸铁。

取1ml供试液于试管中，加入7%盐酸羟胺甲醇溶液2～3滴，10%氢氧化钠溶液2～3滴。置沸水浴上加热数分钟至反应完全，冷却后，加稀盐酸调至pH3～4，然后加入1%三氯化铁乙醇溶液1～2滴，显橙红色或紫色。

(二) 开环-闭环反应

取1ml供试液于试管中，加2～3滴1%氢氧化钠溶液，于沸水浴上加热3～4分钟，得澄清溶液，再加3～5滴2%盐酸使溶液酸化，如溶液变为混浊，表明可能含有内酯类化合物。

(三) 重氮化偶合反应

取1ml供试液于试管中，加数滴5%碳酸钠试剂，于沸水浴上加热数分钟，冷后，加数滴新配制的重氮盐试剂，如呈红色或紫色，表明可能含有香豆素类化合物。

(四) Emerson反应

取1ml供试液于试管中，加0.9% 4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液，显紫色斑点。

八、鞣质和酚类

供试品溶液的制备：取样品粉末1g，加水10ml，在50～60℃水浴中加热1小时，滤过，滤液供作以下试验。

(一) 三氯化铁试验

取滤液1ml，加醋酸酸化后，加数滴1%三氯化铁试剂，溶液显绿、蓝绿或暗紫色。

(二) 三氯化铁-铁氰化钾试验

将滤液滴于滤纸上，喷洒2%三氯化铁水溶液和10%铁氰化钾水溶液(在临用时将这两种溶液等体积混合后喷洒)。酚性成分显蓝色斑点。

(三) 氯化钠-明胶试验

取滤液1ml，加入1%氯化钠-明胶试液1～2滴，如出现白色沉淀或混浊反应，提示试样中含有鞣质。

九、 氨基酸、多肽和蛋白质

供试品溶液的制备：取样品粉末1g，加水10ml摇匀。室温过夜，滤过，滤液供作以下试验。

(一) 加热或加酸沉淀试验

取滤液1ml，加热至沸，如出现混浊或沉淀时，表明含有蛋白质。加入5%硫酸溶液1ml，也有沉淀产生。

(二) 双缩脲试验

取1ml供试液于试管中，加1滴10%氢氧化钠试剂，摇匀，再加0.5%硫酸铜溶液，边加边摇匀，如溶液呈现紫色、红紫色或蓝紫色，表明可能含有多肽或蛋白质。

(三) 茚三酮试验

将滤液滴在滤纸上，喷洒茚三酮试液，于110℃加热后显紫红色斑点。

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(五)》

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