5 病理学检查具体技术要求

5.1 病理剖检前应了解实验动物的一般临床表现,并有相应的记录。

5.2 需要进行病理解剖检查的实验动物的编号、组别、性别等个体信息要有清晰明确的记录。

5.3 剖检前对实验动物的体表应仔细检查,包括动物的被毛(密或疏、光泽、脱毛或污染)和动物体表黏膜状况,观察皮肤及黏膜是否有肉眼可见的色素、角化、贫血、黄疸、水肿、结节、出血、淤血、创伤、糜烂及溃疡等异常改变。在剖检中对组织器官位置、外观、形态、色泽、质地进行仔细观察,判断受试物是否引起动物的组织、器官出现形状、大小、颜色、质地等方面的病理改变,是否出现病理性移位,受试动物的胸腔、腹腔及心包是否有体液残留及其性状(包括颜色及透明度等)改变。

5.4 器官组织摘取时.应按規范的剖检顺序:腹腔剖检、胸腔剖检、盆腔剖检、颈部剖检、体腔器官取出、体腔器官分离和肉眼观察、脑和脊髓剖检、椎体和骨髓剖检进行。剖检中见到的所有病理性改变应做详细记录,必要时需有图片、影像记录。胃摘除后沿胃大弯剪开,将胃内容物用生理盐水漂洗干净,将胃浆膜层粘附于硬纸板上后投入到固定液中,肠道可采用中性福尔马林溶液灌注的方式固定。肺叶取样时需在肺表面覆盖浸含固定液的薄层脱脂棉，以防肺组织漂浮于固定液表面而导致固定不充分,必要时可从支气管注入适量中性福尔马林溶液。肾组织取样时沿肾外缘中线朝肾门方向做一水平切面再行固定。肝组织取样时由肝脏背面沿其长轴每间隔1.5cm～2.0cm纵向平行剖开后固定。心脏取样时沿冠状沟切开后清除掉血块后固定。骨组织在中性福尔马林溶液中固定24h后再进行脱钙。对需做病理检查的取样标本尽量避免外力和器械对组织造成的人工损伤,取样标本大小应适宜,以固定液可以充分浸透中心为宜。

5.5 对试验期间死亡及濒死动物应及时剖检,迅速摘取器官组织后切取适宜的标本固定。

5.6 需要称重的器官组织,在称重前应尽量将周围脂肪组织和结缔组织剔除,并用滤纸吸去器官组织表面血液及体液,特别是肾上腺、甲状腺、前列腺等较小的器官，摘除后要立即称重，防止器官干燥失水而重量减轻。管腔器官组织称重前，应清除其腔内液体，如心脏应除去血块，胃肠道需冲洗出内容物。成对器官组织要一同称量,根据器官组织重量选择适宜的天平,迅速称重并按照组织清单表对剖检动物需摘取的器官组织进行核对后及时固定。

5.7 病理取样标本的固定应根据试验目的和组织标本的特点选择适宜的固定液和固定方式，固定应及时充分,并尽早取材制片。常规固定液为中性福尔马林溶液,根据特殊病理学检查(特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位核酸分子杂交染色，电镜观察等)的需要,应选用其他适宜的固定液。固定液与取样标本体积比至少为4:1,固定时间一般为48h～72h。

5.8 对试验设计方案中要求检查的器官或组织取材的位置、方向(切面)要保持一致,切取的组织块大小适宜,结构完整;非要求器官或部位出现异常时,应保留额外的标本,选择病变中心及正常与病变交界处组织取材;取材记录要完整。

5.9 进行病理学检査的标本根据染色需要进行必要的前处理,对组织进行必要的修切，修切后组织一般厚度应在3mm～5mm,修切后的组织需经脱水、透明、浸蜡及包埋等处理。

5.10 包埋的组织标本应表面平整，切片应包括组织器官的全部结构，石蜡切片厚度一般为3um～5um,同时作多种染色时要采取连续切片。包埋时组织块的最大面或被特别指定部分的组织面应向下,包埋于同一蜡块内的多块细小组织应彼此靠近并位于同一平面上，腔壁、皮肤和粘膜组织必须垂直包埋(立埋)。制片时避免人工损伤。

5.11 常规病理学检查一般为石蜡切片和苏木素-伊红(H&E)染色,必要时可增加组织化学染色(包括特殊染色)、免疫组织化学染色等相关诊断技术进行病理检查。

5.12 组织制片过程中，应确保切片号与蜡块号一致。良好的组织切片应包括受检组织的完整切面,无褶无刀痕,核浆染色分明，分色适度，洁净透明，封裱美观。制片完成后，病理技术人员应将切片与其相应的病理学检查记录和取材工作记录认真进行核对,确认无误后,将制备好的切片及相应的记录等一并移交给病理负责人,交接双方经核对无误后，办理移交签字手续。

5.13 病理负责人阅片时对切片要进行全面观察，阅片应按动物编号或按组织顺序进行,所有切片标本都要按顺序逐一观察,描述并做记录。病理结果描述应客观、细致、全面、形象,应使用标准的病理学专业术语,对有意义的典型病变应有图片记录。需鉴别诊断时应进行特殊染色以确定其性质。

5.14 对非肿瘤性病变性质和范围可采用半定量的方法来区别形态变化的差异。

5.15 肿瘤病理学检查,必须明确区别增生、发育异常、瘤样增生和肿瘤类型。试验观察的结果分为：

a)良性和恶性；

b)原发性和继发性；

c)肿瘤发生率。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（二）》

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