6 大肠埃希氏菌平板计数法(第二法)

6.1 检验程序

大肠埃希氏菌平板计数法的检验程序见图2。

图2 大肠埃希氏菌平板计数法检验程序

6.2 操作步骤

6.2.1 样品的稀释

按5.2.1进行。

6.2.2平板计数

6.2.2.1 选取2个～3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种2个无菌平皿，每皿1mL。同时取1mL稀释液加入无菌平皿做空白对照。

6.2.2.2 将10mL～15mL冷至45℃±0.5℃的结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)倾注于每个平皿中。小心旋转平皿，将培养基与样品匀液充分混匀。待琼脂凝固后，再加3mL～4mLVRBA-MUG覆盖平板表层。凝固后翻转平板，36℃±1℃培养18h～24h。

6.3 平板菌落数的选择

选择菌落数在10CFU～100CFU之间的平板，暗室中360nm～366nm波长紫外灯照射下，计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。检验时用已知MUG阳性菌株(如大肠埃希氏菌ATCC 25922)和产气肠杆菌(如ATCC 13048)做阳性和阴性对照。

6.4 大肠埃希氏菌平板计数的报告

两个平板上发荧光菌落数的平均数乘以稀释倍数,报告每g(mL)样品中大肠埃希氏菌数，以CFU/g(mL)表示。若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告。

相关链接：食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数（二）

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（二）》

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