(一)原理

样品加温除去二氧化碳和乙醇，调pH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。

(二)仪器和试剂

1．仪器

高效液相色谱仪(带紫外检测器)。

2．试剂

(1)甲醇经0.5µm滤膜过滤。

(2)稀氨水溶液(1+1)氨水加水等体积混合。

(3)乙酸铵溶液(O.02 mol／L) 称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经O.45“µm滤膜过滤。

(4)碳酸氢钠溶液(20g/L) 称取2g碳酸氢钠(优级纯)，加水至100mL，振摇溶解。

(5)苯甲酸标准储备溶液 准确称取0.1000g苯甲酸，加碳酸氢钠溶液(20g/L)5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容，此溶液每毫升含苯甲酸1mg，作为储备液。

(6)山梨酸标准储备溶液 准确称取O.100Og山梨酸，加碳酸氢钠溶液(20g/L)5ml，，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容，此溶液每毫升含山梨酸为1 mg，作为储备液。

(7)苯甲酸、山梨酸标准混合使用溶液 吸取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各10．0mL，放入100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含苯甲酸、山梨酸各0.1mg／mL。经0.45µm滤膜过滤。

(三)分析步骤

1．样品处理

(1)汽水 称取5.OO～10.0g样品，放入烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水(1+1)调pH值约等于7，加水定容至10～20mL，经滤膜(HA0.45µm)过滤。

(2)果汁类 称取5.00～10.0g样品，用氨水(1+1)调pH约7，加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经滤膜(0.45µm)过滤。

(3)配制酒类 称取10.0g样品，放入烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水(1+1)调pH值约等于7，加水定容至适当体积，经0.45µm滤膜过滤。

2．高效液相色谱参考条件

(1)色谱柱 YWG—C18 4.6mm×150mm，10µm不锈钢柱。

(2)流动相 甲醇+乙酸铵溶液(0.02mol／L)(5十95)。

(3)流速 1.0mL／min。

(4)进样量 10µL。

(5)检测器紫外检测器，波长230nm，灵敏度0.2 AUFS。

根据保留时间定性，外标峰面积法定量。

(四)结果计算

试样中苯甲酸或山梨酸的含量按以下公式计算。

X=m1*1000/m*V2/V1*1000

式中：X一一样品中苯甲酸或山梨酸的含量，g／kg：

m₁——进样体积中苯甲酸或山梨酸的质量，mg；

V₂——进样体积，mL；

V₁——样品稀释液总体积，mL；

m——样品质量，g。

计算结果保留两位有效数字。