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从仪器学理论角度来讲,HPLC的检测器属于光、机、电、计算机四位一体的技术密集的高科技产品。HPLC的很多性能技术指标都是通过检测器表现出来的。检测器与高压泵、色谱柱的性能技术指标密切相关。高压泵、色谱柱如果出现故障,无论检测器多么好,都不可能得到可靠的分析测试数据;反之,无论高压泵和色谱柱多么好,如果检测器不好,也不可能得到可靠的分析测试数据。因此HPLC的仪器研发者和使用者,都必须重视检测器问题。本节将全面讨论HPLC的检测器及其有关问题。
1.最常用检测器的种类
最常用的检测器有三种(紫外、荧光、示差折光或蒸发光散射):紫外检测器覆盖面约75%;荧光检测器覆盖面约15%;蒸发光散射检测器(包括示差折光检测器)覆盖面约5%。但是现在蒸发光散射检测器非常受重视,中国2010版药典中规定,有近900种药原来用紫外检测器分析,现在很多都改为用蒸发光散射检测器检测。所以,蒸发光散射检测器的覆盖面将会越来越大,它的覆盖面将很快会超过5%,预计会达到8%左右。
对于HPLC的紫外检测器来讲,其波长分为两种:固定254波长检测器和可变波长检测器。根据仪器学理论,一般可变波长使用较多;因为不同波长有不同的摩尔吸光系数(不同的灵敏度),所以可变波长的分析误差优于固定波长检测器。在科研工作中或在要求较高(要求分析测试数据的准确度)的分析测试工作中,作者建议一般不要选用固定波长的紫外检测器。
2. HPLC检测器的最主要性能技术指标
2.1 噪声
从仪器学理论来讲,HPLC的广义可靠性主要包括分析测试数据的准确性、故障率、稳定性和制造厂的售后服务,而噪声是影响分析数据准确性的最重要的性能技术指标,它直接影响HPLC的可靠性。一般来讲,检测器有多大的噪声,分析测试结果中就会增加多少误差。所以,使用者应该经常检测自己使用的各类检测器的噪声,以减少因为噪声太大带来的误差,保证得到较好的分析结果:
2.2 漂移
漂移也是HPLC广义可靠性的内容之一。我们说“稳定可靠”,前提是稳定。如果HPLC不稳定就谈不上可靠。稳定性包括漂移和重复性,所以,“HPLC的漂移小就是稳定性好”的说法不全面;只有漂移小,重复性也好时,才能说HPLC的稳定性好。
2.3 灵敏度(或检测限)
检测限或灵敏度,是HPLC最重要的性能指标之一,也是研发者和使用者制造、购买HPLC的依据。如果灵敏度或检测限太差,就很难完成分析任务。研发者应力求HPLC具有高灵敏度或优秀的检测限;使用者应该根据自己的工作要求选择HPLC的检测限。同时应该经常自己检测所用的HPLC的灵敏度或检测限,以保证HPLC系统能检测低浓度的试样,保证数据的可靠性。
相关链接:HPLC制造者、使用者应该注重缓冲液问题
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