3．表征溶剂特性的重要参数

表征溶剂特性的参数有沸点、分子量、相对密度、介电常数、偶极矩、水溶性等物理性质以及与所用检测器有关的折射率、紫外吸收截止波长。与高效液相色谱柱分离过程密切相关的最重要的溶剂特性参数是溶剂强度参数ε^o、溶解度参数δ、极性参数P'、黏度η、表面引力γ和介电常数e。

(1)溶剂强度参数ε^o 在液固色谱中常用由斯奈德(Snyder)提出的溶剂强度参数ε^o来表示溶剂的洗脱强度，定义为溶剂分子在单位吸附剂表面积A上的吸附自由能(E_a)，表征溶剂分子对吸附剂的亲和程度。

对A1₂O₃吸附剂，

并规定戊烷在A1₂O₃吸附剂上的ε^o(A1₂O₃)=0。

对硅胶吸附剂，ε^o(SiO₂)=0.77ε^o(A1₂O₃)。

ε^o数值愈大，表明溶剂与吸附剂的亲和能力愈强，则愈易从吸附剂上将被吸附的溶质洗脱下来，即对溶质的洗脱能力愈强，从而使溶质在固定相上的容量因子k‘愈小。依据各种溶剂在A1₂O₃吸附剂上的ε^o数值的大小，可判别其洗脱能力的差别，从而得出溶剂的洗脱顺序。各种溶剂的ε^o(A1₂O₃)的数值可参见表9-12。

在液固吸附色谱法中，对复杂混合物的分离难以用纯溶剂洗脱来实现，此时需采用二元混合溶剂体系来提高分离的选择性。在二元混合溶剂中，其洗脱强度随其组成的改变而连续变化，从而可找到具有适用εo值的混合物。在确定了混合溶剂洗脱强度εo的前提下，还应选用黏度低的溶剂体系，以降低柱压并提高柱效。

某些二元混合溶剂的强度，可如图9-37所示，对于给定的ε^o数值，可由图提供几种不同的二元混合溶剂系统。此图最上端横线上的数字标明各种溶剂的溶剂强度参数ε^o，此线下面所有横线上标的数字，是与ε^o数值对应的强极性溶剂的体积分数。从第二条横线开始，左端标记的为二元混合溶剂中极性弱的组分，横线右端标记的为极性强的组分。如欲获得ε^o=0.30的二元混合溶剂，则可由下述混合溶剂提供，如76％二氯甲烷/戊烷、2％乙腈/戊烷、0.4％甲醇/戊烷、50％二氯甲烷/异氯丙烷、2％乙腈/异氯丙烷、0.3％甲醇/异氯丙烷。图9-38对指导如何选择具有确定ε^o值的二元混合溶剂进行等强度溶剂洗脱来改善分离的选择性，具有重要的实用价值。

在二元混合溶剂中，当极性强的溶剂在混合物中的体积分数小干5％或大于50％时，会引起分离因子a值的较大变化，当样品中的组分与溶剂分子形成氢键时，更会引起a值的巨大变化。使用二元混合溶剂的不足之处，是由于非极性溶剂(如戊烷)和极性溶剂(如甲醇)有时不能以任意比例混合，而发生溶剂的分层现象。为此可加入分别能与这两种溶剂混溶的具有中等极性的第三种溶剂(如异丙醇、二氯甲烷、二氯乙烷、乙酸乙酯等)，构成三元混合溶剂系统，而使混合溶剂强度发生改变，并可使用梯度洗脱操作。

图9-37  高效液相色谱法洗脱液混合物的溶剂强度

对以硅胶为固定相的液固色谱法，当欲分离不同类型的有机化合物时，所选用的作为流动相的溶剂，应具有适用溶剂强度参数。表9-13提供的溶剂强度参数可供参考。

表9-13  在硅胶吸附剂上分离各种有机化合物适用的溶剂强度参数

①指单官能团化合物，对多官能团化合物需较大的ε^o值。

②叔胺需小的ε^o值，对伯胺和仲胺需较大的ε^o值。