紫外吸收检测器(UVD)是高效液相色谱仪中使用最广泛的一种检测器，它分为固定波长、可变波长和二极管阵列检测三种类型，分别介绍如下。

1．固定波长紫外吸收检测器

固定波长紫外吸收检测器，由低压汞灯提供固定波长λ=254nm(或λ=280nm)的紫外线，其结构如图9-24所示。由低压汞灯发出的紫外线经入射石英棱镜准直、再经遮光板分为一对平行光束分别进入流通池的测量臂和参比臂。经流通池吸收后的出射光，经过遮光板、出射石英棱镜及紫外滤光片，只让254nm的紫外线被双光电池接收。双光电池检测的光强度经对数放大器转化成吸光度后，经放大器输送至记录仪。

图9-24  固定波长紫外检测器
1-低压汞灯；2-入射石英棱镜；3, 4-遮光板；5-出射石英棱镜；6-滤光片；7-双光电池；8-流通池；9，10-测量臂的入口和出口；11,12-参比臂的入口和出口

为减少死体积，流通池的体积很小，仅为5～10uL，光路为5～10mm，结构常采用H形，如图9-25所示。此检测器结构紧凑、造价低、操作维修方便、灵敏度高，适于梯度洗脱。现多用于核苷酸或核酸的测定仪中。

2．可变波长紫外吸收检测器

可变波长紫外吸收检测器的结构示意图见图9-26。

图9-25  紫外检测器流通池
1-流通池；2-测量臂；3-参比臂；4-入射光：5-出射光

图9-26  双光束可变波长紫外可见吸收检测器
1-氘灯；2-钨灯；3,9,11-凹面镜；
4-入口狭缝；5-单色器；6-出口狭缝；
7-滤光片；8-调制器；10-测量池；
12-参比池；13-光电倍增管；
14-双凹面镜

由光源(氘灯—紫外线；钨灯—可见光)发出的光经凹面镜、入口狭缝进入单色器，从出口狭缝射出。经滤光片，由调制器将光线分别交替射入测量池和参比池光路。再经凹面反光镜，将光聚集在光电倍增管进行检测。检测波长范围为190～600nm，流通池体积为1～10uL。

可变波长紫外吸收检测器，由于可选择的波长范围很大，既提高了检测器的选择性，又可选用组分的最灵敏吸收波长进行测定，从而提高了检测的灵敏度。它还有停流扫描功能，可绘出组分的光吸收谱图，以进行吸收波长的选择。它是现在应用最多的检测器。

3．光二极管阵列检测器

光二极管阵列检测器(PDAD)是20世纪80年代发展起来的一种新型紫外吸收检测器，它与普通紫外吸收检测器的区别在于进入流通池的不再是单色光，获得的检测信号不是在单一波长上的，而是在全部紫外线波长上的色谱信号。因此它不仅可进行定量检测，还可提供组分的光谱定性的信息，已获广泛使用。

单光路二极管阵列检测器的光路示意图如图9-27所示。由氘灯发出的紫外线经消除色差透镜系统聚焦后，照射到流通池(4.5uL)上，透过光经全息凹面衍射光栅色散后，由一个二极管阵列检测元件接收。此光路系统中光闸是唯一的运动部件，它有三个动作位置：

图9-27  二极管阵列检测器光路示意图
1-氘灯；2-消色差透镜系统；3-光闸；4-流通池；5-全息凹面衍射光栅；6-二极管阵列检测元件

①光闸将入射光束全部遮挡，以进行暗电流补偿；

②将氧化钛滤光片插入光路，对衍射后的波长进行精确校正；

③打开光闸使入射光通过流通池照在光栅上。

此光学系统称为“反置光学系统”，不同于一般紫外吸收检测器的光路。其中二极管阵列检测元件，可由1024、512或211个光电二极管组成，可同时检测180～600nm的全部紫外线和可见光的波长范围内的信号。由211个光电二极管构成的阵列元件，可在10ms内完成一次检测。因此在1s(1000ms)内，可进行快速扫描以采集20000个检测数据。它可绘制出随时间(t)的变化进入检测器液流的光谱吸收曲线—吸光度(A)随波长(λ)变化的曲线，因而可由获得的A,λ,t信息绘制出具有三维空间的立体色谱图(图9-28)，可用于被测组分的定性分析及纯度测定。全部检测过程由计算机控制完成。

图9-28  A-λ-t三维色谱图

相关链接：高效液相色谱仪－色谱柱