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一.肺炎衣原体
1965年白我国台湾一名儿童的眼结膜分泌物中分离首株肺炎衣原体(C.pneumoniue),故命名为TW(Taiwan)-183。1983年又从西雅图一名患咽炎的大学生咽部分离出一株AR-39,因两者的一些生物学特性类似于鹦鹉热衣原体,当时将其归于鹦鹉热衣原体中TWAR组。以后根据其独特的超微结构、基因及特异性抗原分析,于1989年正式定名为肺炎衣原体。肺炎衣原体只有一个血清型,代表株为TWAR,是一种重要的呼吸道病原体。
a、生物学特性
1.形态染色 肺炎衣原体的原体形态多样,电镜下可呈现典型的梨形,平均直径为0.38um。肺炎衣原体包涵体不含糖原,故碘染色阴性。
2.培养特性 鸡胚对肺炎衣原体不敏感,因此,一般不用鸡胚传代,而HL和Hep-2细胞株较易分离和传代,但在第一代细胞培养中很少形成包涵体,离心能促进肺炎衣原体对细胞的感染。
3.抗原与分型 肺炎衣原体具有属特异性抗原和种特异性抗原,属特异性抗原主要为细胞壁的脂多糖和相对分,子质量为39500的主要外膜蛋白;种特异性抗原是相对分子质量为98000的主要外膜蛋白。肺炎衣原体只有一个血清型。
4.基因组 TW-183株基因组全长1225935 bp,G+C的摩尔分数为40.57%,无质粒、前噬菌体和转座子样序列存在。AR-39株的基因组全长1229858 bp,G+C的摩尔分数为40.6%,研究还发现AR-39株基因组中存在前噬菌体。研究表明,不同来源的TWAR株具有94%以上的DNA同源性,与沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体基因组的DNA同源性均小于10%。
5.抵抗力 抵抗力较弱,易受各种理化因素的影响。对药物的抗菌谱类似于其他衣原体,对磺胺类耐药。
b、临床意义
肺炎衣原体是人类呼吸道疾病的重要病原体,主要引起成人及青少年的非典型肺炎,同时还可致支气管炎、咽炎、鼻窦炎及扁桃体炎等急性呼吸道感染。
感染后潜伏期平均约30天,肺炎衣原体呼吸道感染多数表现为咽痛、声音嘶哑、发热、咳嗽(以干咳为主),以及胸痛、头痛、不适和疲劳等。异常呼吸音和鼻窦区压痛为最常见的特征,外周血白细胞计数大多正常。老年患者临床表现可能较为严重,有时甚至是致死性的,尤其是合并细菌感染或存在慢性阻塞性肺炎等基础疾病时。
此外,发现肺炎衣原体感染与冠心病、心肌梗死、扩张型心肌病等心血管疾病以及脑血管疾病等具有相关性,其发生机制有待研究。
c、微生物学检验
(一)标本采集
由于痰液标本对培养细胞有毒性,临床上通常采集咽拭子。也可用气管镜采集气管内痰液或肺泡灌洗液。接种细胞培养的标本宜用膜式滤菌器除去杂菌,不加抗生素。若进行血清学试验,取患者的外周血及其血清标本。
(二)标本直接检查
1.显微镜检查Giernsa染色或免疫荧光单克隆抗体染色检测肺炎衣原体包涵体及原体,方法简便,但阳性率较低。
2.核酸检测采用PCR技术检测肺炎衣原体DNA,不仅敏感性高,且可与其他两种衣原体进行区分。
(三)分离培养与鉴定
鸡胚卵黄囊接种因阳性率低已少用。目前通常采用细胞培养法,取咽拭子或下呼吸道标本,接种Hep-2细胞或Hela229细胞,再用肺炎衣原体单克隆抗体直接或间接法荧光染色,以是否出现包涵体而作出结论性报告。
(四)血清学试验
1.微量免疫荧光(MIF)法该法是目前最常用的血清学方法,以TWAR的原体为抗原,检测患者肺炎衣原体抗体。若IgM抗体效价不小于1:16和/或IgG抗体效价不小于1:512或双份血清抗体效价升高不小于4倍者,可诊断为急性感染;若IgM抗体效价不大于1:16或IgG抗体效价在(1:8)~(1:256),则为既往感染。该法特异性、敏感性均较高,且可用于区分原发感染和再感染。
2.补体结合抗体检测以衣原体属的原体为抗原进行补体结合试验,若抗体效价不小于1:64和/或双份血清抗体效价升高不小于4倍者,均可诊断为急性感染,但不能区分是哪种衣原体感染。
二.鹦鹉热衣原体
鹦鹉热衣原体(C.psittaci)首先分离于鹦鹉体内,以后陆续从多种鸟类和禽类的体内分离出来,是引起禽类呼吸道和消化道疾病的病原体,也可引起人类呼吸道感染。
a、生物学特性
鹦鹉热衣原体也具有独特的生活周期。可形成致密的包涵体,包涵体形态不一,不含糖原,碘染色呈阴性,此点可与沙眼衣原体进行鉴别。鹦鹉热衣原体可在鸡胚卵黄囊、HeLa细胞和Vero细胞中生长,小鼠为易感动物。鹦鹉热衣原体对磺胺类药物耐药。
鹦鹉热衣原体能产生红细胞凝集素,为卵磷脂核蛋白复合物,可凝集鸡和小鼠的红细胞,且与红细胞结合非常牢固。特异性抗体和Ca2+可抑制其凝集作用。
b、临床意义
鹦鹉热衣原体主要引起鸟类或家禽类感染,且多为隐性持续性感染,甚至终生携带。通过粪便和上呼吸道排出的分泌物传染给人类和其他哺乳动物,引起人类上呼吸道感染、肺炎和毒血症,称为鹦鹉热,为人畜共患病。
潜伏期为1~2周,患者多呈急性发病,寒战、头痛、咳嗽和胸痛,体温很快上升至39~40℃,典型的临床表现为传染性非典型肺炎,干咳、少量黏痰,有时可呈铁锈色痰,X射线检查可见肺部有单个或多个实变性阴影。也有缓慢发病或隐性感染者,一般不发生人与人之间的传播。
c、微生物学检验
采集患者的血液、痰、咽喉含漱液或动物的活体标本(如肝、肺、脾等组织)。痰液宜加链霉素处理以减少杂菌。将标本接种于小鼠腹腔、鸡胚卵黄囊、HeLa细胞或Vero细胞中。将标本直接涂片或取培养物涂片、常规染色镜检,查看有无衣原体及嗜碱性包涵体。也可采用ELISA、核酸杂交等直接检测标本中的病原体及其成分。血清学试验常采用补体结合试验和ELISA法,此外,也可进行间接血凝试验。
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