一、分类

弗朗西斯菌属(Francisella）包括土拉热弗朗西斯菌（F. tularensis）和新凶手弗朗西斯菌（F. novicida)和蜃楼弗朗西斯菌（F. philomiragia) 3个种，仅土拉热弗朗西斯菌与人类疾病有关。其代表种也为土拉热弗朗西斯菌（简称土拉菌），为纪念美国公共卫生学家Fdward Frencis首次培养此菌成功而得名。本属细菌DNA的GEC的摩尔百分比为36％～38％。土拉热弗朗西斯菌分4个亚种：土拉热亚种（F.tularensis subsp.tularensis),旧北区亚种（F.tularensis subsp. holy rctica)、中亚亚种（F.tularensis subsp. mediaasiatica)和新杀亚种（F.tularensis subsp.nevicida)。人类的土拉菌病多数由土拉热亚种和旧北区亚种土拉菌引起，土拉热亚种感染致死率高，旧北区亚种感染一般不致死，常用于减毒疫苗的研究。

土拉热弗朗西斯菌多分布在北半球的一些国家，在我国黑龙江、吉林、西藏、青海、新疆等省、区也有分布。

二、生物学特性

弗朗西斯菌为小杆菌，大小为0.2 um×(0.2～0.7)um，培养24 h呈多形态性，表现为豆形、球形、杆状或丝状等形态，革兰染色阴性，常呈两端浓染。无鞭毛，无芽胞，强毒株有荚膜。

本菌专性需氧，最适生长温度为35℃，营养要求较高，在普通培养基上不生长，生长必需半胱氨酸或胱氨酸，常用培养基为血清-卵黄培养基或血清-葡萄糖-半胱氨酸培养基，培养2～4天后，在含卵黄培养基上形成光滑、有光泽、与培养基同色的菌落。在胱氨酸血琼脂培养基上，有毒株形成灰色、光滑型菌落，菌落周围有绿环；无毒株则形成粗糙型、青绿色菌落。该菌与布鲁菌、鼠疫耶尔森菌有共同抗原，可产生血清学交叉反应。

三、临床意义

土拉热弗朗西斯菌是土拉热（tularemia)/土拉菌病的病原菌，上拉热是一种严重的人兽共患病。土拉热弗朗西斯菌主要为某些啮齿类、野兔、鸟类等野生动物的病原菌，尤以野兔最常见，人类对该菌高度易感，接触患病动物或间接通过吸血节肢动物（如蜱、螨、虱等）、昆虫（如蚊子、牛虻等）叮咬后可感染，也叮通过污染食物、水或尘埃等多途径感染，该菌侵袭力强，能穿透完整的皮肤和黏膜。人感染后，潜伏期为3～5天，常突然发作，表现为发热、寒颤、头痛、关节痛、全身中毒症状、休克，严重者则死亡。根据不同的症状又分为多种临床类型，如溃疡腺型（皮肤溃疡伴局部淋巴结炎）、胃肠炎型、肺炎型、伤寒样型、脑膜炎型等。

本菌虽不产芽胞，但在土壤、淤泥、水及动物尸体中可存活数月之久。在千草中可存活6个月。土拉热可在啮齿类等野生动物中因带菌节肢动物的叮咬而自然流行，人与人之间不能相互传染，所以患者不是传染源。

土拉热弗朗西斯菌具有高传染性、感染剂量低、致病性强等特点。注射10CFU、与皮肤接触10～50 CFU、或摄入多于10² CFU该菌都能导致土拉热感染。因此，该菌与鼠疫、炭疽等同列为A类恐怖源，已引起全世界的高度重视。

四、微生物学检查

1．检验程序土拉热弗朗西斯菌的检验程序见图18-5。

图18-土拉热弗朗西斯菌的检验程序

2．标本采集采集患者的血液、淋巴结穿刺液、痰液、组织穿刺液等标本。

3．直接镜检因为本菌细胞壁薄而致密，标本涂片未经处理革兰染色不易着色。通常先将标本涂片用3％盐酸酒精固定，再用苯酚甲紫或吉姆萨染色则易着色，染色后观察菌体形态。

4．分离培养将标本接种在血清一卵黄培养基或血清-葡萄糖-半胱氨酸培养基上，35℃培养2～3天，观察菌落特征。或将标本接种于敏感动物如小白鼠，接种后一般在4～7 h死亡，病理解剖如发现肝、脾中有肉芽肿病变可初步诊断为土拉菌感染，再进一步分离鉴定。

5．鉴定该菌为革兰阴性小杆菌，发酵糖及醇的能力较弱，能发酵葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气，但对乳糖、蔗糖、甘露醇等均不发酵。触酶阳性，分解尿素，氧化酶阴性，不产生吲哚。

6．抗体检测常用脂多糖（LPS)作为抗原检测患者中相应抗体，方法很多，如微凝集试验、试管凝集实验、ELISA法、斑点酶联免疫法等，其中微凝集试验是应用最广，也是最简单、快速的手段，可用于土拉菌感染的早期诊断。患者发病一周后即出现血凝抗体，一个月时抗体达高峰，并持续存在10年以上。在实验室，将患者血清与土拉热弗朗西斯菌抗原致敏的红细胞做间接血凝试验，测定血清抗体效价，若单份血清效价＞1:160，结合病史及体征可初步诊断。恢复期和急性期双份血清抗体效价升高不小于4倍时有诊断意义。

7．抗原检测直接荧光抗体试验或免疫组化染色可用于临床标本或感染组织标本检测，由于敏感性较低或操作复杂，临床应用不是很广。

8．药物敏感试验 对土拉热弗朗西斯菌一般不进行常规药敏试验。治疗药物首选链霉素和庆大霉素，另外，氯霉素、环丙沙星、四环素也有较高的治愈率。

由于本菌属于强传染性菌种，细菌分离鉴定应在生物安全3级实验室内进行，应防止交叉感染，工作人员需经过专业培训并接受预防接种。