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肠球菌属(Enterococcus)原归类于链球菌属,1984年命名为肠球菌属。常栖息在人、动物肠道及女性生殖道内,曾认为肠球菌对人类无害,近年来研究证实该属细菌有致病潜力,是引起医院感染的重要病原菌肠球菌细胞壁较厚,对多种抗生素耐药,给抗菌治疗带来很大困难。
一、分类
经16S rRNA序列分析和核酸杂交等将肠球菌分为5群19个种。临床常见的多为第2群,如粪肠球菌(E.faecalis)、屎肠球菌(E.faecium)。肠球菌能与D群链球菌抗血清反应,故曾被称为D群链球菌。肠球菌属细菌DNA的G+C的摩尔分数为37%~45%。
二、生物学特性
1.形态与染色肠球菌为革兰阳性球菌,直径0.6~2.0 um,成双或短链状排列,故与肺炎链球菌难以区别。无芽胞,无英膜,部分肠球菌有稀疏鞭毛。
2.培养特性营养要求较高,兼性厌氧,最适生长温度为35℃,多数菌株在10℃和45℃均能生长。在血平板上生长可形成灰白色、不透明、表面光滑、圆形、直径0.5~1 mm的小菌落,常不溶血,偶见α溶血现象。与链球菌属的显著区别在于肠球菌能在高盐(6.5% NaCI、高碱(pH 9.6),高胆汁(40%)和10~45℃的环境条件下生长。
3.生化反应触酶多阴性,能分解多种糖类,胆汁七叶苷水解试验阳性,万古霉素敏感,吡咯烷酮芳基酰胺酶阳性。
4.抵抗力近年来耐药菌株不断增多,表现为对氨基糖苷类高水平耐药和万古霉素耐药,临床应给予高度重视。
三、临床意义
肠球菌是肠道正常菌群,常定居于肠道和女性泌尿生殖道,为机会致病菌。在肠球菌引起的感染中以尿路感染最常见,多为院内感染,常与尿路器械操作、留置导尿管和患者尿路结构异常等有关。肠球菌亦是引起老年人和严重基础疾病患者败血症的常见病原菌。
需注意的是,肠球菌对大多数常用的抗菌药物呈固有耐药性,由于近年来抗菌药物的不合理应用,导致肠球菌耐药菌株逐年增多。
四、微生物学检验
(一)检验程序
肠球菌检验程序见图14-3。
图14-3肠球菌检验程序
(二)标本采集
根据病种的不同,采集不同的标本,如尿液、血液及脓性分泌物等。
(三)直接检查
标本涂片、革兰染色镜检,可见成双或短链状排列的卵圆形革兰阳性球菌。
(四)分离培养
含5%动物血的琼脂即可用于分离培养肠球菌,经35~37℃孵育24 h为小菌落,α溶血或不溶血,粪肠球菌的某些菌株可出现β溶血。若标本中含有革兰阴性杆菌,可用选择性培养基,如叠氮胆汁七叶苷琼脂进行分离培养,该培养基可抑制革兰阴性杆菌的生长,且肠球菌菌落为黑色,便于筛选。
(五)鉴定
1.确定菌属与群按表14-3将肠球菌属与其他触酶阴性的革兰阳性球菌区别,确定肠球菌属后再按表14-7区别各群。
表14-7肠球菌属各群区别
2.肠球菌属内种的区别 临床分离率高的是Ⅱ群,群内种的鉴别见表14-8。
表14-8肠球菌Ⅱ群菌种鉴别
注:EFRO表示依罗霉素敏感试验;MGP表示甲基-α-D-吡喃葡萄糖苷试验。
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