一、实验目的

掌握用气相色谱一氢火焰离子化检测法测定酱油中3一氯一1，2一丙二醇含量的原理和方法。

二、实验原理

样品中的3一氯一l，2一丙二醇(3一MCPD)经色谱柱分离、净化后，与苯基硼酸衍生成3一氯一1，2一丙二醇苯基硼酸酯。该衍生物经气相色谱分离后，通过氢火焰离子化检测器测定，以内标法定量。

三、仪器与试材

1．仪器与器材

气相色谱仪(带氧火焰离子化检测器)、石英毛细管柱(25m×0．2mm，0．33肛m)、超声波发生器、旋转蒸发器、玻璃色谱柱等。

2．试剂

除特别说明外，实验所用试剂均为分析纯，水为去离子水或蒸馏水。

(1)常规试剂：正己烷、无水乙醚、丙酮、无水Na2SO4(650℃灼烧4h，冷却后储于密闭容器中)、苯基硼酸(纯度≥97％)、ExtrelutNT硅藻土。

(2)常规溶液：苯基硼酸溶液(250rag／mL，称取6．25g苯基硼酸，加1．25mI。水，以丙酮溶解并定容至25mL)、NaC1溶液(120g／L、30g／L)。

(3)3一MCPD标准储备液(1mg／mL)：称取0．100g3MCPD(纯度≥99％)于100mL容量瓶中，用NaCl溶液(120g／L)溶解并定容。

(4)1，2一丙二醇内标溶液(1％，体积分数)：取0．5mL1，2一丙二醇(纯度≥99％)于50mI一容量瓶中，用水溶解，定容。

3．实验材料、

3～4种不同品牌的酱油，各50mL。

四、实验步骤

1．样品提取和衍生

(1)取10．000g酱油置于底层装有1g无水Na2SO4、上层装有7gExtrelupNT硅藻土的玻璃色谱柱中。打开色谱柱活塞，使酱油进入硅藻土中，关闭活塞，静置40mIn。

(2)以150mL无水乙醚洗涤色谱柱，流速为3mL／min，收集淋洗液于250mL具塞锥形瓶中。

(3)将淋洗液旋转蒸发浓缩至近干，以NaCl溶液(30g／L)溶解、洗涤浓缩液3次，每次

1mL，溶液转移至10mL具塞比色管中。

(4)加入0．10mL内标溶液和1mL苯基硼酸溶液于比色管中，塞紧比色管塞，摇匀，于

90℃保温20min后，冷却至室温。

(5)加入2mL正己烷，振摇1min，静置分层后，将上层清液移入1mL具塞样品瓶中，供测定。

2测定

(1)相对质量校正因子的测定：取10．000g酱油样品，添加适量的3一MCPD标准储备液后，按“样品提取和衍生”的实验步骤处理后，按下述色谱条件测定。扣除试剂本底，按下式计算3一MCPD的相对质量校正因子_厂。

(2)取2“L样品提取衍生溶液，注入气相色谱仪，在下述色谱条件下进行测定。根据保留时间，确定3一MCPD和1，2一丙二醇(内标物质)衍生物响应峰的位置，并记录3一MCPD衍生物和1，2丙二醇衍生物响应峰的面积，计算样品中3一MCPD的含量。

(3)参考色谱条件：色谱柱为石英交联毛细管色谱柱；进样口温度为250℃；检测器温度为300℃；氢气流速为30mL／min；空气流速为400mL／min；尾吹气流速为30mL／min；载气为高纯氮气(纯度≥99．99％)，柱头压为100kPa，流速为0．46mL／min；进样方式为分流进样，分流比为20：1。氢气、空气和尾吹气的流速可依据仪器说明书适当调整。

五、注意事项

实验步骤中的色谱条件仅作参考，在实际实验过程中应该根据仪器型号和实验室条件进行调整。