裸小鼠是1966年发现和培育的一种小鼠突变系，此种小鼠先天无毛、无胸腺，T淋巴细胞功能完全缺乏，对异种移植不产生免疫排斥反应。因此，特别适用于异种动物组织的移植和人类肿瘤异种移植。1969年Rygarrd和Povlsen首次将人结肠癌成功地移植于裸小鼠体内，建成了裸鼠移植瘤动物模型。此后，人们相继将人类结肠癌、乳癌、肺癌、卵巢癌、黑素瘤、胃癌、宫颈癌、肾癌、口腔癌、唾液腺癌、软组织肉瘤、骨肉瘤、淋巴瘤和白血病等肿瘤移植于裸鼠，并且能够良好生长和传代，肿瘤移植成活率为35.7%。如果用已建成的人类肿瘤细胞系作移植材料，接种后的成活率更高（41％～100%）。

移植后的人体肿瘤在裸小鼠体内仍保持其原有的组织形态、免疫学特点及特有的染色体组型，以及对抗癌药和电离辐射的原有反应特性。移植后的人体功能性肿瘤也能保持其原有的功能。大量研究结果表明，人体肿瘤／裸小鼠系统是研究人体肿瘤的一种较为理想的模型系统。近年来，裸鼠移植瘤动物模型已广泛用于：①体外培养瘤细胞株的鉴定；②在裸鼠体内连续接种传代人体肿瘤组织，提高体外培养的成功率；③研究肿瘤在体内的生物学行为，从而探讨肿瘤与宿主免疫间的相互关系；④研究肿瘤侵袭转移的生物学特性。

【材料】

1．组织来源人体肿瘤组织；癌性胸、腹水标本；肿瘤细胞系等。

2．移植受体裸小鼠。

3．培养用液消化液（0.25%胰蛋白酶或0.1％胶原酶）、无血清RPMI 1640培养液、0.Olmol/L的PBS。

4．器具 眼科剪、眼科弯镊、手术刀、套管针头。直径60mm培养皿、离心管、1 ml注射器并带6号针头、标本瓶等。

【方法】

1．取材

(1)手术或活检标本：在无菌条件下，切取适当大小的肿瘤组织，及时放入含无血清培养液的标本瓶。然后，在超净台内，去除脂肪、结缔组织及坏死瘤组织，并用无血清培养液洗涤2次，将其剪成lmm³大小的组织块，加适量PBS，备用。

(2）癌性胸、腹水标本：用穿刺针抽取10～30m1的胸、腹水直接以1200r/min离心5分钟，然后用无血清培养液离心洗涤2次，重新悬浮于适量PBS中，用0.4％锥虫蓝染色，计数活细胞数。

(3)体外培养的瘤细胞系：贴壁生长的癌细胞可用消化液使细胞脱壁、分散，接着用无血清培养液离心洗涤2次，计数活细胞数，调整细胞密度，将细胞悬浮于PBS中备用。悬浮生长的瘤细胞可按胸、腹水的处理方法制备瘤细胞悬液。

2．接种

(1)瘤组织块法：接种前，用碘酊和乙醇消毒接种部位的皮肤。用无菌套管针抽吸一小瘤块，接种于裸鼠的腋下或背部肩肝区皮下。进行放射免疫显像实验时，接种部位应远离小鼠甲状腺区。

(2)瘤细胞悬液法：用带6号针头的注射器抽取适量瘤细胞悬液接种于裸鼠的腋下或背部皮下，每个接种部位注射0.2ml，含10⁶～10⁷个活细胞。

3．观察与测量接种瘤细胞后，将裸小鼠送回无特殊病原体饲养室饲养，定期观察小鼠精神、饮食及排便等状况，称量小鼠体重，用游标卡尺测量肿瘤结节的长度和宽度。将肿瘤体积变化对时间在算术坐标纸上绘出生长曲线。一般说来，初代移植成活率为30％～40%。移植后经不同潜伏期（10天至3个月），可见肿瘤生长。终止实验时，可杀鼠取瘤块称重。

【注意事项】

1．取材时，应切取肿瘤实质部位，不要取坏死、液化部位，同时要防止污染。以细胞系（株）作为移植材料时，应取处于对数增殖期的细胞，这样可提高成活率。

2．实验用裸小鼠应来源于无特殊病原体饲养条件下繁殖的动物室，最好在实验前经一周检疫观察，此期间动物死亡率超过10％不宜应用。裸小鼠一般选用体重18～22g,4～6周龄，常用的品系有BALB/c(nu/nu)品系。

3．对裸鼠实验室及饲养环境应严格消毒，对鼠笼、垫料及饲料和饮水也应灭菌处理，防止裸鼠在实验期间感染有害病菌。

4．在夏季，应注意给裸鼠通风、降温；在冬季，应注意保温。一般饲养室内温度控制在(25±1)℃，用高效过滤器每小时换气10～15次。相对湿度应保持在40%～60%，每日应当保持10小时光照、14小时无光的明暗周期。