［实验器材]

1．仪器

倒置显微镜、一体式计算机、数码照相机、显微摄影系统、CO2培养箱、超净工作台。

2．试剂与材料

台盼蓝染色液、生理盐水、酒精棉球、镊子、手术剪、载玻片、盖玻片、血细胞计数板、擦镜纸、洗耳球、肿瘤细胞培养物、新鲜洋葱。

［操作步骤]

1．开机前准备

摘除防尘罩，小心折叠并摆放于倒置显微镜后方。如有必要，使用酒精棉球擦拭载物台表面粉尘，待酒精和水分挥发干燥。

使用显微镜观察时，须在实验台上严格区分出“实验操作区”和“实验记录区”，分别在显微镜的两侧。操作区摆放待观察样品和辅助器械，记录区摆放实验讲义和原始记录本。

2．开机

确认光强调节处于最小状态，开启电源开关。通过转换器选择l0×接物镜合轴正对光路。若是0:100分光的三目倒置显微镜，需关闭三目接口。

3．寻找、观察和记录显微影像

正确摆放预观察的样品于载物台上，使聚光镜光路通过样品区。调节聚光镜的光圈拨杆至小光圈位置，通过粗调螺旋使接物镜抬升接近载物台。
观察者双眼正对接目镜，调节双目头的相对位置，使与观察者双眼的瞳距相同，此时通过粗调螺旋使接物镜慢速远离载物台，能粗略观察到样品显微影像时，改用微调螺旋小心调节，以便获得相对清晰的视场。

为了获得更清晰的视场，操作者可自行匹配微调、光圈和光强这三者的调节程度。更换不同视场时，可借助手动方式移动样品；精确移动视场时，需要借助机械载物台的X-Y移动旋钮。

当需要变换不同放大倍数的接物镜时，用与转换器倾斜方向相同的手操作转换器进行切换。切换后，及时匹配微调、光圈和光强的调节程度。通常，低倍数观察需要较小的光圈和较弱的光强，高倍数观察则需要较大的光圈和较强的光强，才能获得令观察者舒适的、影像清晰的视场。一台显微镜的各种放大倍数的接物镜在设计上一般都是齐焦的，即都可以在某个放大倍数的清晰视场下，通过转换器切换即可获得不同接物镜组合的清晰视场。

值得注意的是，高倍数观察时的视场和景深均比低倍数的小，但高倍数观察时的分辨率比低倍数的高。因此，在高倍数观察时，仅调节微调螺旋，且慢速调节，也正因为此原因，在进行样品观察时，通常先用5×或l0×接物镜组合的光路进行观察。

利用显微摄影系统或数码相机记录显微影像时，需要通过拨动拨杆或拉开拉杆的方式来开启三目接口。不同厂家倒置显微镜三目口与目镜的分光比不同，如MoticAE21是20:80分光，COICXDS-1B是0:100分光。0:100分光就是目镜端有显微视场时，三目端无；三目端有显微视场时，目镜端无。

4．关机及保养操作

注意，在连续使用倒置显微镜期间，不得频繁开关机，以免烧坏光源灯泡。

使用结束后，尤其准备离开实验室前，务必及时关闭电源开关。

检查载物台有无粉尘或废弃液，如有必要，使用酒精棉球擦拭载物台表面粉尘。待酒精和水分挥发干燥后，调节旋钮使光强处于最小状态。罩上防尘罩。

［结果观察与记录]

1．记录所用过仪器的完整型号，格式如“MoticAE21倒置显微镜”。

2．了解影响目镜最佳视野获取的主要可调节因素：微调、光圈和光强等的调节原则。

3．描述贴壁细胞形态特征和悬浮细胞形态特征。