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一、培养用液存放
培养用液包括液体培养基、无菌BSS缓冲液、消化液、小牛血清或胎牛血清以及其他无菌试剂的存在需要注意保存于冰箱中相应的温度区域。
一般将未添加血清的培养液和含血清培养液、无菌BSS缓冲液保存于4℃冰箱,而将消化液、小牛血清或胎牛血清、100×抗生素溶液(D-PBSA配制)、100×谷氨酰胺溶液等保存于-20℃冰箱。保存于-20℃冰箱的溶液需解冻后使用。
保存状态的各种培养用液,需要注意密封和避光。存放培养用液的冰箱需要定期检查内部的洁净状态和霜冻情况,发现污迹和霜冻时需及时去除。
4℃冰箱存放的试剂瓶应摆放整齐,留有适当空隙以便取放。试剂瓶的标签或标识应朝外。
冰箱门上存放的溶液应谨慎摆放,在开关冰箱门时产生的一般震动应不容易使瓶内溶液接触到试剂瓶瓶盖。
二、有效期
保存于-20℃冰箱的培养用液,有效使用时间比较长。-20℃冰箱冻存的试剂尽量避免反复冻融,否则会导致活性物质损失。为此,一般需要按照常规使用量的情况预先进行分装后再保存,如胎牛血清的保存。
在4℃保存的细胞培养用液的应用液,一般建议在2-3周内使用。因为许多活性物质在低浓度下,其半衰期会大大缩短。有时,也会发现4℃长期保存的应用液出现霉菌菌落,此种情形的可能原因是无菌操作过程不够严格,或应用液内少量的微生物在足够长的生长时间内形成的,因为长期使用的冰箱会聚集一些低温微生物。
特别注意的是,某些溶液由于容易出现沉淀,通常建议现配现用。
总而言之,不含添加物的培养液在4℃可以保存4-9个月,含谷氨酰胺、血清、抗生素的培养液,在4℃只能保存2-3周。因此,含有不稳定组分的培养液或添加物要长期存放时,最好保存于-20℃冰箱,如谷氨酞胺、血清、抗生素的100×或l0×母液,都是分装后在-20℃以下的温区保存。
当然,存放各种溶液或试剂的冰箱是否发生故障,或是否出现过长时间停电的状况,都需要操作者密切关注。此两种情况发生后,都会直接影响存放溶液或试剂的有效期,有时是致命的,会导致溶液或试剂完全失效。
一些种类的荧光会导致核黄素和色氨酸变质成有毒物质,主要是过氧化物。因此,建议在使用含这些成分的各种溶液的过程中,尽量缩短试剂瓶暴露在荧光灯下的时间,或使用遮盖物覆盖,如用锡箔纸包裹培养液试剂瓶。
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