首先，为什么要在洁净区进行无菌操作和细胞培养？对于此问题，可以从超净工作台的使用、无菌操作的条件、微生物污染源的控制程度等方面分析。

其次，动物细胞培养的实验室或车间与其他实验室或车间的区别体现在环境因素控制上有哪些主要差异？这些环境因素主要包括洁净度、温度、湿度、光照。

在动物细胞培养中，常见的微生物污染有细菌、霉菌和酵母。有些细菌污染属于快生长细菌，有些属于慢生长细菌。

对于操作过程中发现的培养物微生物污染，如何快速查找污染源和污染原因分析是很有必要的，因此，操作者是否具有良好的微生物学基础知识培训和技能训练就显得尤其重要。

污染源和污染原因分析是避免再次发生培养物微生物污染新措施的制订，是去除可能污染源的操作依据。

一、环境温度

洁净间是进行无菌操作及培养仪器摆放的场所，理想的温度控制范围是15-25℃。冬季不低于15℃，夏季不高于25℃。由于清洗消毒灭菌工作及经常的室外空气对流要求，辅助间的理想温度是10-30℃。

根据空间的大小，可以选择安装合适的空调机组、暖气装置等设施。

在控温区域，挂有温湿度表，以便日常观察记录环境温度和环境相对湿度（图4-6)。

二、环境湿度

进行细胞培养所需的洁净间和辅助间，理想的相对湿度范围是30%-50%，环境的相对湿度高于60％时容易滋生霉菌等微生物，增加无菌操作的难度，并明显缩减灭菌器材的存放有效期。

（一）降低环境湿度的措施

日常间隔时段打开辅助间窗户，会增加辅助间室内、外的空气对流，也可以明显降低环境空气湿度。

使用空调机组、换气装置等均可降低环境空气湿度。

合理摆放发热类仪器可以降低局部环境湿度，如把电热干燥箱安放在容易空气对流经过的位置。

洁净间内不安装自来水水槽，或者虽然有安装但尽量少用。

（二）增加环境湿度的情形

日常除尘清洁中会增加空气湿度，如使用自来水浸湿或消毒剂浸泡的湿布拖抹地面、实验台面、仪器表面等情况。为此，建议采用吸尘器除尘，擦抹时尽量减少水分后再进行，擦抹后及时使用除湿措施，如使用空调的除湿功能、开启换气装置、辅助间打开窗户让内外空气对流。

室内自来水水槽的设计、仪器的摆放与使用有时会明显增加局部环境湿度，如辅助间进行清洗消毒灭菌时，尤其在高压蒸汽灭菌后会增加辅助间甚至洁净间的相对湿度。因此，相应操作后务必选择采用上述合理的方法，降低室内的空气湿度。一般水槽设计时处于建筑物窗户的内侧，高压蒸汽灭菌器摆放于当采取降湿措施时空气对流容易经过的位置。自来水水槽、纯水机组出水口等位置容易溢出或溅落多余的水，每次使用后需及时检查并去除。

季节变换时，如春季、夏季，往往容易产生较高的环境湿度。除了使用空调机组、除湿机等除湿外，可以加装定时换气装置。

高湿的楼宇环境和地理环境相对湿度较高，如处于地下室和楼层低的实验室，处于南方的实验室。这些实验室必须考虑安装有换气效能高等定时换气装置，并正确使用。

三、光照与照明

细胞培养实验室的洁净间或辅助间应有足够的采光窗户，但需注意，有阳光直射的窗户周边应避免摆放仪器设备，或者使用遮阳窗帘拦截太阳光。直射的阳光会缩减仪器的使用寿命和降低仪器的质量，并且，当需要紫外消毒灭菌时，阳光或其他可见光会降低紫外消毒灭菌效果。

室内日光灯的安装要保证足够的照明，其照度要求类似一般实验场所。室内安装有紫外灯时，设计上满足紫外与照明不可同时开启的要求。

当进行超净工作台紫外杀菌时，尽量保持其所处的室内环境如洁净间关闭照明，使用窗帘遮挡，使室内可见光缩减到最低程度，以便确保紫外杀菌的最大效果。