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一、实训目标
1.熟悉分光光度计的使用;
2.掌握工作曲线法的应用;
3.掌握检验结果的处理及检验报告的书写。
二、实训原理
益母草口服液中生物碱含量以盐酸水苏碱的含量来计算。
盐酸水苏碱0.1%的盐酸溶液在520nm波长处有最大吸收,可根据工作曲线法,在520nm波长处测定其吸光度,求出益母草口服液中生物碱含量。
三、实训仪器与试剂
1.仪器
紫外-可见分光光度计;容量瓶;烧杯。
2.试剂
0.lmol/L的盐酸溶液;益母草口服液(市售);lmg/mL的盐酸水苏碱对照品溶液;4.2%的硫氰酸铬铵溶液(现配制)。
四、实训步骤
1.标准工作曲线的绘制
精密量取盐酸水苏碱对照品溶液2mL、4mL、6mL、8mL,分别置25mL的烧杯中,加0.lmol/L的盐酸溶液至l0mL,各加活性炭0.5g(140℃干燥-5h,备用),置沸水浴中加热半分钟,边加热边搅拌,滤液置25mL容量瓶中,用0.lmol/L的盐酸溶液l0mL分次洗涤烧杯和滤器,洗液并入同一容量瓶中。
另取0.lmol/L的盐酸溶液20mL,置另-25mL容量瓶中,作为空白溶液;各精密加入新制的2%的硫氰酸铬铵溶液3mL,摇匀,用0.lmol/L的盐酸溶液稀释至刻度,摇匀;置冰水浴中放置1h,用干燥滤纸过滤,取续滤液,以0.1mol/L的盐酸溶液为空白,用紫外-可见分光光度计,在520nm处分别测定吸光度,用空白试剂的吸光度分别减去对照品溶液的吸光度,以吸光度的差值为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。
2.含量的测定
精密量取本品l0mL,置25mL容量瓶中,用0.lmol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,用干燥滤纸过滤,精密量取续滤液l0mL,置25mL烧杯中,照标准曲线的制备项下的方法,自“加活性炭0.5g"起,依法测定吸光度,用空白溶液的吸光度减去供试品的吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中相当于盐酸水苏碱的含量,计算即得。平行测定三次。
本品每1mL含生物碱以盐酸水苏碱(C7H13NO2•HC1)计,不得少于1.0mg。
五、注意事项
(1)记录检验药品的规格、批号、包装及数量:根据药品包装确定。
(2)测定吸光度时,应注意吸收峰波长位置的准确性,除另有规定外,吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±lnm以内。
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