芽孢染色法的步骤

孔雀绿染液配制

孔雀绿(malachite green) 5g；蒸馏水 100mL。

番红水溶液配制

番红 0.5g；蒸馏水 100mL。

苯酚品红溶液配制

碱性品红 3g溶于100mL 70%酒精中 ；取上述溶液10mL与100mL 5%的苯酚溶液混合，过滤备用。

黑色素(nigrosin)溶液配制

水溶性黑色素 10g；蒸馏水 100mL；称取10g 黑色素溶于100mL 蒸馏水中，置沸水浴中30min后，滤纸过滤2次，补加水到100mL，加0.5mL 甲醛，备用。

染色

将培养24h左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定；滴加3-5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上；

用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4-5min。这一步也可不加热，改用饱和的孔雀绿水溶液（约7.6％）染10min；

倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止；用番红水溶液复染1min，水洗；待干燥后，置油镜观察。

结果

芽孢呈绿色，菌体呈红色。