A.1 一般规定

本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂和制品，在没有注明其他要求时均按GB/T601、GB/T602、GB/T603之规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.2 鉴别试验

A.2.1 溶解性

溶于水及乙醇水溶液，不溶于石油醚和三氯甲烷。

A.2.2 色泽

0.1%水溶液中性时为红棕色透明溶液，水溶液碱性时为深红棕色透明溶液。

A.2.3 颜色反应

取1%试样的水溶液少许，滴于滤纸上，干燥后置于氨蒸气中，样点转变成橙黄色，立即置紫外光下观察，具有黄绿色荧光。

A.2.4 最大吸收峰

取1g试样，用水定容到100mL，从中取出1mL，再用水定容到100mL，此溶液在波长500nm±10nm处有最大吸收峰。

A.2.5 纸层析

A.2.5.1 仪器和设备

A.2.5.1.1 层析缸。

A.2.5.1.2 毛细管。

A.2.5.1.3 滤纸：15cm×7cm。

A.2.5.2 试剂和材料

A.2.5.2.1 正丁醇。

A.2.5.2.2 冰乙酸。

A.2.5.2.3 展开剂：正丁醇：冰乙酸：水=4∶1：5(体积比)。将三者加入到分液漏斗中，充分振摇，静置24h以上。取上层作为展开剂。下部水层放入到一个小烧杯中，放入层析缸作为平衡液。

A.2.5.3 分析步骤

将展开剂上层加入到大培养皿中，而展开剂下层水液加入到小烧杯中，二者均平放到层析缸底部。盖上盖，使层析缸空间为展开剂蒸汽充分饱和。

在距滤纸一端的1.5cm处用细铅笔轻划一条线，在此线处点1%高粱红水溶液试样，斑点直径不超过2mm，风干，重复点样三次。放入层析缸内，在温度16℃±1℃条件上行展开。待流动相溶剂进行到滤纸的三分之二处时，取出滤纸，用铅笔划出展开剂前沿和斑点位置形状。

A.2.5.4 结果计算

第一组分的比移值(R_f1)和第二组分的比移值(R_f2)分别，按式(A.1)和式(A.2)计算：

式中：

b₁——原点到第一组分点中心距离，单位为厘米(cm)；

a——原点到展开剂前沿距离，单位为厘米(cm)；

b₂——原点到第二组分点中心距离，单位为厘米(cm)。

A.2.5.5 比移值结果

R_f1应为0.9±0.05；

R_f2应为0.5±0.05。

A.3 色价(500nm±10nm)的测定

A.3.1 方法提要

通过测定试样溶液在特定波长处的吸光度来表示试样的纯度。

A.3.2 仪器和设备

分光光度计。

A.3.3 分析步骤

准确称取试样1g(准确到0.0002g)，用水溶解，置于100mL容量瓶中定容，摇匀；从中取出1mL，用水定容到100mL容量瓶中，摇匀。取此溶液置于1cm比色皿中，在波长500nm+10nm处测定吸光度。试样溶液的浓度应使测出的吸光度在0.2～0.7范围内为最佳，当试样溶液的吸光度大于0.7时，可用水将溶液稀释至适当的浓度，然后测定。

A.3.4 结果计算

色价(500nm±10nm)按式(A.3)计算

式中：

A——稀释后试样溶液的吸光度；

n——稀释倍数；

m——试样的质量，单位为克(g)。

试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的2%。

A.4 pH的测定

称取高粱红色素试样1.0g，用二级水溶解后，置于100mL容量瓶中，用二级水定容，用酸度计测定pH。

A.5 干燥失重的测定

A.5.1 方法提要

在规定温度下，将试样烘干至恒重，然后测定试样减少的质量。

A.5.2 仪器和设备

称量瓶，直径5cm，高3cm。

A.5.3 分析步骤

称取试样2g(精确至0.0002g)，置于已在105℃±2℃烘至恒重的称量瓶中，放入105℃±2℃烘箱中，烘至恒重。

A.5.4 结果计算

干燥失重的质量分数w1，按式(A.4)计算：

式中：

m₁——称量瓶和试样干燥前的质量，单位为克(g)；

m₂——称量瓶和试样干燥后的质量，单位为克(g)；

m₀——试样的质量，单位为克(g)。

两次平行测定结果之差不大于0.2%，取其算术平均值为测定结果(精确至小数点后一位)。

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(五)》

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