全血、血清、血浆样本在DNA检测过程中的区别
来源/作者:来宝网  日期:2020-05-21

很多的血液类DNA提取试剂盒在适用样本上都会写上全血、血浆、血清均可适用,所以很多老师在做核酸诊断类的实验时,就认为这三种样本都可以使用,选择比较随意,但是得到的结果往往并不尽如人意,那么这三种样本有什么区别,对核酸诊断实验有什么影响呢?

简单来说,血浆是全血的一部分,血清是血浆的一部分。全血包括血浆和血细胞(红细胞、白细胞、血小板),血浆包括血清和纤维蛋白原。

从核酸诊断的角度来讲,人的基因组DNA更多的存在于白细胞中,而只有少量游离DNA存在于血清中,但如果白细胞大量凋亡,血清中的游离DNA量会有所增加。而具有致病性的病原体核酸大量存在于血清中,几乎不存在于血细胞中。

所以,如果是以人的核酸为检验目标,如筛查地中海贫血症,筛查色盲基因等,应该以全血作为实验样本,因为血清和血浆中所含有的人的核酸数量远远少于全血,检测灵敏度会降低很多。

而如果是以病原体核酸为检验目标,如检测乙肝感染情况,检测感冒病毒等,则以血清或血浆为实验样本,这会天然地剔除血细胞这种杂质,明显降低核酸提取过程中的难度,有利于提高核酸纯净度,增加检测反应灵敏性和稳定性。

而血清和血浆相比,一方面血清中含有更少的纤维蛋白原,一方面血清中的DNA是循环DNA,主要来源于病变组织,所以使用血清作为实验样本,可以更进一步提高样本纯净度,减少蛋白杂质,提高病原体浓度,获得更为灵敏的检测结果。

对于试剂盒而言,在相同体系下,样本杂质越少,DNA的提取质量就越高。以GNT系列的血液DNA提取试剂盒为例,如果是以全血为样本,通常每个样本加入的血液量为200ul,得率稳定在3-8ug;但若是进行病毒核酸提取,应血清为样本,每个样本加入的血清量应为150~200ul,相比于血液试剂盒的体系,血清试剂盒的提取效率会提高30%甚至更多。

考虑实验目的,谨慎选取样本,会获得更好的实验结果。

【关键词】细胞 菌种 培养基 普天同创