1．原理

试样中的黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2用乙腈一水(84+16)提取，提取液经过滤、稀释后，用多功能柱净化。净化液吹干后加入流动相定容以液相色谱法荧光检测器测定各种黄曲霉毒素的含量，外标法定量。

2．试剂和材料

甲醇(液相色谱纯)、乙腈(色谱纯)、硝酸(65％)、溴化钾、多功能净化柱(My-coseP226)。

黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2标准品。黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素Gl 2.0μg／L，黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G2 0.5μg／L溶于乙腈中。

标准储备溶液：准确移取1．0mL上述黄曲霉毒素标准品溶液，以乙腈稀释至10．0mL作为标准储备溶液。标准工作液：准确移取1.0mL上述黄曲霉毒素标准储备溶液，以乙腈稀释至10．0mL作为标准工作液。

3．仪器

称量天平、高速均质器、高效液相色谱仪(配荧光检测器)、柱后衍生化装置、真菌毒素蒸发器、均质器、色谱柱(C18柱，柱长150mm，内径4．6mm，填料直径5μm)。

4．测定步骤

(1)提取 称取试样约25g(精确至0.1g)于500mL具塞锥形瓶中，加入100mL乙腈一水(84+16，体积)提取液，以均质器高速搅拌提取3min，过滤。

(2)多功能柱净化 吸取约55mL滤液加人多功能柱的试管中，将MFC柱套管套入试管内。缓慢将套管推至试管底部，使提取液通过MFC柱进入套管中。从套管内准确移取1．0mL净化液至5mL棕色小瓶中。于50℃下吹干。加人流动相定容至0.5mL，过0.45μm滤膜供HPLC分析用。

(3)测定

①色谱条件 色谱柱：15cm×4．6mm(内径)，5μm，LiChroCART C18柱。流动相甲醇-乙腈-水(215+215+570，体积)，每升中加入120mg溴化钾及200μL硝酸，流速1．0mL／min。检测条件：激发波长365nm，发射波长440nm。进样量：100bμL(样液)。柱后衍生化装置：100μA。

②色谱测定 以程序进样方式，移取适量的标准储备溶液，以流动相稀释成5个不同浓度的标准工作液。以化学工作站建立标准工作中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素Gl、黄曲霉毒素G2的响应值与相当于样品中黄曲霉毒素含量的线性方程，并对样液的色谱数据进行处理。在上述色谱条件下，黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G2衍生物的保留时间约为3.5min：4.2min、4.7min、5.7min。