一、概述

(一)主要来源

皂苷(saponin)广泛存在于植物中，在百合科、薯蓣科、玄参科、豆科、远志科、五加科等植物中含量较高。许多中草药和其他植物中都含有皂苷，如人参、柴胡、远志、大豆等。皂苷结构复杂，且彼此差异较大。按皂苷元的化学结构皂苷可分为两大类：一类为甾体皂苷，多由27个碳原子所组成，主要来源于百合科、薯蓣科和玄参科；另一类为三萜皂苷，多由30个碳原子组成，主要来源于五加科、远志科、葫芦科和豆科。

人参皂苷(ginsenoside )属于三萜类皂苷，是人参、西洋参和三七中的主要有效成分。主要有人参皂苷 Ra₁、Ra₂、Rb₁、Rb₂、Rc、Rd、Re、Rf、Rg₁、Rg₂、Rh₁、Rh₂、Rh₃等。黄芪皂苷(astragaloside)主要来源于豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，主要有黄芪皂苷I～Ⅷ，其中黄芪皂苷Ⅶ又称黄芪甲苷(astragaloside Ⅶ)。

(二)理化性质

皂苷多为白色或乳白色无定形粉末，少数为晶体，大多数皂苷分子大、不易结晶，易吸潮，具有苦味或辛辣味。皂苷分子极性较大，易溶于热水、热乙醇、甲醇中，且在正丁醇中有较大的溶解度，难溶于丙酮、乙醚、乙酸乙酯等有机溶剂。皂苷能和某些试剂，如浓硫酸、二氯乙酸、五氯化锑等产生颜色反应。

(三)保健功能

皂苷对人体的新陈代谢起着重要的生理作用。它可以抑制血清中脂类氧化，防止过氧化脂质对肝的损伤和动脉硬化，具有抗衰老的作用。某些皂苷还具有解热、镇静、抗肿瘤等活性。个别皂苷有特殊的生理活性，如人参皂苷能增进DNA和蛋白质的合成，提高机体的免疫力；三七皂苷具有扩张冠状血管，降低心肌耗氧，保护心脏的功效；远志、桔梗皂苷等有祛痰止咳的作用；柴胡皂苷有抗菌活性；大豆皂苷具有降低胆固醇、抗血栓功效等。

(四)分析方法

常见的有分光光度法、薄层扫描法、气相色谱法、高效液相色谱法、高效液相-质谱联用法等。分光光度法常用于总皂昔的测定；高效液相色谱法是目前检测皂苷类成分最常用的方法，检测器主要有紫外检测器、蒸发光散射检测器、荧光检测器和示差检测器。目前我国“保健食品检验与评价技术规范”推荐方法有“保健食品中总皂苷的分光光度法”和“保健食品中的人参皂苷的高效液相色谱法”。

二、保健食品中总皂苷检验

1．原理保健食品中的总皂苷用水经超声波提取，Amberlite-XAD-2大孔树脂预柱分离净化，在酸性条件下，提取物中总皂苷与香草醛生成有色化合物，以人参皂苷Re为标准，于560nm波长处测定吸光度值，标准曲线法定量。

2.分析步骤

(1)样品处理：对于固体试样，称取一定量的样品，加入一定量的水，超声波提取，水定容，摇匀。

对于含有乙醇的液体样品，在水浴上挥干，用水溶解残渣后，进行柱层析。非乙醇类的液体试样，可根据其浓度高低，稀释后取一定量进行柱层析。

用内装Amberlite-XAD-2大孔树脂和少量中性氧化铝的10m1注射器作层析管。依次用70％乙醇和水洗柱，弃洗脱液。加入已处理好的样液，用水洗柱，弃洗脱液，再用70％乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液，置于60℃水浴上挥干。

(2)测定：吸取一定量人参皂苷Re标准溶液，低于60℃挥干溶剂后，与上述处理过的样品同时准确加入香草醛冰乙酸溶液和高氯酸，60℃水浴上加热15分钟，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸，摇匀，于560nm波长处测定吸光度值。

3.方法说明显色时间和温度对结果均有影响，故在实验中应注意准确控制；因冰乙酸具有挥发性，加入后应立即测定。大孔树脂是一种具有吸附速度快、选择性好、易解吸附的高分子吸附剂。本方法选用Amberlite-XAD-2或D101大孔树脂做固相分离、净化能达到良好的效果。

三、保健食品中人参皂苷检验

1．原理保健食品中的人参皂苷经提取、净化处理后，采用梯度洗脱，反相C₁₈柱色谱分离，紫外检测器检测。根据色谱峰的保留时间定性，峰面积标准曲线法定量，可用于保健食品中人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd的同时定量分析。

2，分析步骤

(1)样品处理：对于固体试样，取片剂或胶囊内容物研成粉末，并过20目筛；精确称取一定量样品加水超声波提取，准确取出一定量样液，通过D-101大孔吸附树脂净化柱(大孔吸附树脂使用前先经甲醇浸泡，水洗)。先用水洗去杂质，弃去水洗脱液，然后用70％甲醇洗脱皂苷，收集甲醇溶液，水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并定容、离心、过滤后，进行色谱分析。

对于液体试样，取一定量的试样于水浴上蒸干，残渣加水用超声波提取，余下步骤同固体试样处理。

(2)测定：色谱条件为反相C₁₈柱(250mm×4.6mm, 5 um)；检测波长：203nm；流动相：A液为乙腈,B液为水；梯度洗脱：0～20分钟，16%A+84%B→18%A+82%B; 20～55分钟，18%A+82%B→40%A+60%B;55～75分钟，40%A+60%B→100%A ; 75～80分钟，100%A→16%A+84%B；柱温：35℃；流速：1ml/min。

3．方法说明

(1)经紫外扫描，人参皂苷在190～200nm有最大吸收，考虑到检测波长在200nm以下多数有机物都有很强的紫外吸收，对测定干扰大，本实验选用203nm为检测波长。

(2)本方法对六种人参皂苷的最低检出浓度为10mg/g。适用于人参含片、人参冲剂、人参茶、人参胶囊等以人参为主要原料的保健食品中人参皂苷的含量的测定。

四、保健食品中黄芪甲苷检验

1．原理保健食品中的黄芪甲苷经提取、浓缩等前处理后，反相C₁₈柱色谱分离，以乙腈-水为流动相，蒸发光散射检测器检测。根据色谱峰的保留时间定性，峰面积标准曲线法定量。

2．分析步骤

(1)样品处理：对于固体试样，取片剂或胶囊内容物研成粉末，混匀，精确称取一定量样品置于索氏提取器中，加甲醇冷浸过夜，加热回流4小时，提取液回收甲醇至干，残渣加水，微热使溶解，以乙醚轻摇洗涤两次，水溶液再用水饱和的正丁醇振摇提取6次，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，正丁醇液回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解并定容、过滤后，进行色谱分析。

对于液体试样，取一定量的试样减压浓缩至近干，残渣加水溶解，余下步骤同固体试样处理。

(2)测定：色谱条件为反相C₁₈柱(250mm×4.6mm, 5um);柱温：35℃；检测器：蒸发光散射检测器，温度100℃,氮气流速2.4L/min；流动相：乙腈-水(30+70)；流速：1ml/min。

3．方法说明保健食品中黄芪甲苷的含量一般较低，为了提高供试液中黄芪甲苷的含量，在测定前利用甲醇和正丁醇进行反复提取。本方法适用于以黄芪或黄芪提取物为主要原料的保健食品中黄芪甲苷含量的测定。

相关链接：保健食品功效成分检验

文章来源：《食品理化检验》

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