在油脂脂肪酸组成分析中，使用最普及的分析法有气相谱法、高效液相色谱法、红外光谱法、质谱法以及联机(气相色谱一红外光谱，气相色谱-质谱)法。红外光谱及质谱起着鉴定器的作用，如红外吸收光谱可以方便地鉴定官能团，在质谱中采用大气压化学离子源(APCI)可以方便地用于极性、难挥发性化合物的离子化，通过电喷雾电离、APCI谱图可获得平均相对分子质量及相对分子质量分布信息。通过这些仪器的分离鉴定，不仅对油脂、脂肪酸及其衍生物能进行定性定量分析，而且可以对其分子结构，相对分子质量或官能团等进行鉴别。本文仅就广泛使用的气相色谱法进行扼要叙述。

1．实验原理

本实验采用气相色谱法对食品中脂肪酸组成进行分析，其测定原理为将试样所含油脂进行皂化，脂肪酸经甲酯化后，用石油醚或正己烷提取。在一定的条件下利用样品中各组分在色谱柱中流动相和固定相的分配系数不同来达到样品的分离。与标准品进行比较，以保留时间进行定性，峰面积进行定量。

2．试剂

1 mol/L KOH-甲醇溶液：取氢氧化钾56g，用甲醇溶解，定容至1000mL。

1 mol/L HCI-甲醇溶液：甲醇溶液500 mL，称重。将分析纯HCI溶液滴加到氯化钙中产生气体HCI，通入500mL甲醇溶液中，一定时间后再称重，直到原甲醇溶液增加了36.5g即可。

正己烷或石油醚。

3．仪器设备

冷冻干燥机、恒温水浴锅、电子天平，气相色谱仪GC(HP6890)。

4．检测步骤

(1)样品处理将适量样品进行冷冻干燥，在研钵中充分磨细(也可取鲜样直接匀浆)。称取干燥样品50mg左右(根据脂肪含量而定)于带螺盖10mL刻度试管中。加1mol/L KOH-甲醇溶液4mL，旋紧管盖，在75～80℃水浴中保温15min，取出，待冷却后加1 mol/L HCI甲醇溶液4mL，继续在75～80℃水浴中保温15min，取出，冷却后加正己烷(或石油醚)1mL充分振荡萃取1 min。静止分层(需要时稍加水有利于分层)，使脂肪酸甲醋溶于正己烷层。

(2)测定用微量进样器取上清液1 uL，上机进样，进行气相色谱分析。采用氢火焰离子化检测器(FID)，色谱柱为毛细管柱(内径0.25 mm，膜厚0.25 um，长30m，最高温度300℃)。

(3)分析条件采取程序升温，柱温：150℃保留1min，经15℃/min升至200℃，再经2℃/min升至250℃。汽化室温度为250℃，检测器温度为250℃。氮气压力0.4MPa,氢气压力0.2～0.3MPa，空气压力0.4MPa。

5．数据处理

(1)定性分析比较未知峰与同样条件下测得的脂肪酸标样的保留时间，对脂肪酸进行定性分析。

(2)定量分析组分的含量与峰面积成正比，根据面积归一法求出脂肪酸的相对含量。

6.注意事项

(1)待测样品不宜加热干燥，否则脂肪酸易被氧化。

(2)进行脂肪酸皂化和甲酯化时，应注意温度和时间的控制。

相关链接：脂肪总量的测定

文章来源：《食品质量与安全检测技术》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。