在HPLC仪器中，对元部件的测试非常重要。因为元部件的性能技术指标，会直接影响光学类分析仪器整机的性能技术指标。我们说，讲指标必须讲测试方法，讲测试方法又必须讲测试的仪器设备。否则，没有意义。因为，对同一指标，不同测试方法、不同的测试设备会有不同的结果。例如，对单色器这个关键核心部件杂散光的测试，就有很多理论和实际问题需要认真考虑。例如，对同一台光栅单色器的杂散光，用截止滤光溶液测试和用截止滤光片测试时，在同一波长处(如220nm处)，其杂散光的数值是不同的；用同一测试材料，离开测试点的距离不同，测试的结果数据也是不同的；用不同的测试材料测试时，离开截止点距离相同，结果也是不同的。如：作者曾用激光法(氦氖激光器的632.8nm)测试±5nm处的杂散光，和用NaBr测试±5nm处的杂散光，结果也相差很多；用测试点离截止点5nm的NaBr溶液和用测试点离截止点38nm的NaI溶液测试结果也是大不一样的所以，即使是统一用截止滤光法测试杂散光，使用的材料不同，结果也不同。反之，用同一种材料测试方法不同，结果也是不同的。

对光栅单色器这个部件的杂散光测试非常重要。应该引起有关的科技工作者高度重视。这个问题涉及测试方法、测试材料、测试点、测试设备等。本节根据作者的实践，重点对光栅单色仪这个关键部件测试的有关问题进行讨论。

1．杂散光的测试方法

目前，国内外的HPLC仪器的研制者和使用者们，在杂散光的测试工作中，都是根据作者对杂散光的定义进行的。特别是对HPLC的杂散光测试，最常用的测试方法是所谓“截止滤光法”(the cut off filter method)，或称作“滤光片法”(the filter method)。截止滤光法主要是采用滤光片或滤光液来测试杂散光二只有极少数科技工作者，有时采用He-Ne激光器的632.8nm来测试杂散光；具体做法是：在离632.8nm±5nm处进行测试，测出的数值就是杂散光。

杂散光的测试方法：仪器冷态开机，预热半小时：如用“滤光片法”测试，则参比为空气；如用滤光液来测试，则参比为溶剂；如果用NaI、NaNO₂水溶液，则参比为蒸馏水。设置仪器的纵坐标为％T，横坐标为波长(nm)；用滤光液时，试样比色皿中装滤光液，参比比色皿中装溶解，将波长GOTO到相应的波长上(NaI为220nm、NaNO₂为340nm)就可测试。杂散光测试的示意图如图3-31所示。

图3-31 杂散光测试测的示意图

图3-31中，测试220nm处的杂散光时，国际上都是采用10g/L的NaI水溶液。10g/I，的NaI水溶液的光谱特性为：0～258nm处不透光，而从258nm开始，透光率可立即达到90％以上，并且上升坡度很陡。我们只要将10g/L的NaI水溶液装入比色皿，参比比色皿中装满水，将仪器的波长GOTO到220nm。此时，因为10g/L的Nal水溶液在0～258nm处不透光，故仪器的输出应该为0。但仪器的实际输出不是0，即有光信号输出，这就是220nm处的杂散光。

测试340nm处的杂散光时，国际上都是采用50g/L的NaNO₂水溶液。50g/L的NaNO₂水溶液的光谱特性为：0～385nm处不透光，而从385nm处开始，透光率可达90％以上，并且上升坡度很陡。我们只要将50g L的NaNO₂水溶液装入比色皿，参比比色皿中装满水，将仪器的波长GO TO到340nm。此时，因为50g/L的NaNO₂水溶液在0～385nm处不透光，故仪器在340nm处的输出应该为0。但仪器的实际输出不是0，即有光信号输出，根据作者的定义，这就是340nm处的杂散光。

2．杂散光的测试材料

杂散光的测试材料中，可分为滤光片和滤光液两种。滤光片又分为带通滤光液和截止滤光片两种。滤光液则有很多种，如丙酮, NaI、NaBr、KC1(12g/L)NaNO₃等。

美国ASTN提出的杂散光测试方法中，规定了多种滤光液(主要用于紫外、可见光区)和滤光片(主要用于红外区)来作为标准滤光材料。并且，ASTM方法于1977年被确定作为美国一种国家标准。W. Slavin等曾报道过18种截止滤光片或滤光液，可用来测定各类光学类分析仪器的杂散光。L. Cahn等曾用Vycor(Corning Sil-ica)来检测220nm处的杂散光。Richard等曾报道过7种测试紫外区不同波段杂散光所采用的滤光液。

另外，也偶见国外个别厂商采用测量离中心波长50cm^-1,或几十个埃()处的透射光强度与中心波长处透射光强度之比的大小，来作为衡量HPLC仪器杂散光的指标。

作者从实际情况出发，结合科研工作的需要，采用带通滤光片ZWB₁，截止滤光片JB₆和NaI滤光液以及Anthtrancc溶解在乙醇中)滤光液等，分别对原上海光学仪器厂生产的55W光栅单色仪的220nm、357nm、436nm和446nm等波长处的杂散光进行了测试，得到了满意的结果。

滤光片和滤光液中，哪种好呢？Slavin和Richard等曾经做过讨论：Slavin等认为用溶液能给出真实的杂散光，用滤光片则可能低估杂散光。Richard等则认为滤光片有非常广阔的截止区(broad cut off)，而滤光液的截止要比滤光片更加锐利，并且它给出了NaBr水溶液和Corning Vycor滤光片二者相比较的“透过率一波长”关系的实测值。但Richard没有具体明确评论何者为好。作者通过实践，认为对滤光材料的选择或评价其优劣，不能简单定论，而应从实际情况出发。因为使用滤光片(如Vycor)时，虽说操作简单，但是：理想优质的滤光片很难得到；在进行杂散光测试时，需要用参考片基(例如SiO₂)，而理想的参考片基一般不大容易找到；滤光片吸收一部分杂散光，所以，用它来测试杂散光时，往往容易低估杂散光。而使用滤光液时(如NaBr溶液)，虽说测量结果较准确，且参考物质为H₂O，容易得到，但标准滤光液也不容易得到。同时，滤光液还受比色皿的影响。