一、双波长法同时测定水中微量Cr(Ⅵ)和Mn(Ⅶ)

当组分x与组分y的吸收光谱重叠时，不能在各自的最大吸收波长分别测定含量，根据吸光度加和性的原理，可以选定两个波长，分别在两波长的条件下测定混合物的吸光度，然后解联立方程，求出各自的浓度。

图5-21MnO₄^-和Cr₂O₇^2-的吸收曲线

在H₂SO₄溶液中，Cr₂O₇^2-和MnO₄^-的吸收曲线如图5-21所示。

(1)选择测定波长应选两组分吸收值差别大(△ε大)而吸收曲线。值随波长变化率(△ε/△λ)较小的区域内的波长。根据Cr₂O₇^2-和MnO₄^-的吸收曲线，可选440nm和545nm作为测定波长。

(2)测定KMnO₄和K₂Cr₂O₇标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，计算摩尔吸光系数于8个50mL容量瓶中，分别加入0.005mo1/L KMnO₄标准溶液1.00、2.00、3.00、4.00(mL)、0.0200mol/L K₂Cr₂O₇标准溶液1.00、2.00、3.00、4.00(mL)，用0.25mo1/L H₂SO₄溶液稀释至刻度，摇匀。分别在440nm和545nm波长下，以0.25mo1/L H₂SO₄溶液作为参比，测定各溶液的吸光度。分别绘制A-c曲线，计算出_ε440(Mn)、ε_440(Cr)、ε_545(Mn)、ε_545(Cr)。

(3)测定样品溶液的吸光度，计算MnO₄^-、Cr₂O₇^2-浓度吸取一定体积的样品溶液，用0.25mo1/L H₂SO₄溶液稀释至刻度，摇匀。分别在440nm和545nm波长处，以0.25mol/L H₂SO₄溶液作为参比，测定样品溶液的吸光度，解下面联立方程组：

A₄₄₀＝ε_440(Mn)c_(Mn)＋ε_440(Cr)c_(Cr)

A₅₄₅＝ε_545(Mn)c_(Mn)＋ε_545(Cr)c_(Cr)

求出样品溶液中的c_(Mn)和c_(Cr)。

二.二阶导数分光光度法同时测定锗和钼

Ge和Mo与苯基荧光酮和氯代十六烷基形成的三元络合物的吸收光谱严重重叠(见图5-22)，而二阶导数吸收光谱中，Ge和Mo的吸收峰呈现较大的差异(见图5-23)，因而可对Ge、Mo分别进行含量测定。

图5-22  Ge和Mo苯基荧光酮-氯代十六烷基吡啶三元络合物的吸收光谱图

图5-23  Ge、Mo三元络合物的二阶导数吸收光谱

测定步骤如下：

①首先配制100.0ug/mL Ge和10.0ug/mL Mo标准溶液。

②制备三元络合物，分别移取各为10.0ug/mL浓度的Ge、Mo标准溶液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00(mL)于6个20mL比色管中，然后向每个比色管中分别加入3.0mol/L H₂SO₄溶液6.00mL，0.3g/L苯基荧光酮乙醇溶液4.00mL和5g/L,氯代十六烷基吡啶1.50mL，再用水稀至标线，摇匀、放置5 min后用于测定。

③测定三元络合物的吸收光谱和二阶导数吸收光谱。

分别取不同浓度的Ge、Mo三元络合物2mL，以试剂溶液作为空白，在400～600nm波长范围扫描，绘制其吸收光谱和二阶导数吸收光谱图。在导数吸收光谱图中，Ge的吸收峰在498～513nm, Mo的吸收峰在534～551nm。

④标准工作曲线的绘制由二阶导数吸收光谱图中Ge和Mo的峰面积对标准溶液浓度绘制峰面积(A)-浓度(c)图。

⑤样品测定。取2mL Ge、Mo未知混合液，绘制二阶导数吸收光谱图，测Ge、Mo吸收峰的面积，再由标准工作曲线，测定Ge、Mo含量。

测定可在具有绘制导数光谱图功能的TU-1901可见紫外分光光度计上进行。