(国家技术监督局1990-03-29批准，1990-12-01实施）

1 主题内容与适用范围

本标准规定了测定土壤中有效硼的姜黄素吸光度法。

本标准适用于各类土壤有效硼的测定。

2 测定原理

土壤用热水浸提出的硼，与作物对硼的反映有较高的相关性。浸提液中硼在草酸存在下与姜黄素作用，经脱水生成玫瑰红色的络合物。用乙醇溶解后测定其吸光度。红色络合物溶液在0.0025～0.05ugB/mL范围里，符合朗伯-比尔定律。

3 主要仪器设备

试验中所用玻璃器皿使用前应用1+3盐酸浸泡2～4h，然后用水冲洗干净并晾干。

3.1 土样筛(尼龙筛）2.0mm方孔筛。

3.2 分析天平，感量0.0001g,0.00lg。

3.3 分光光度计。

3.4 电热恒温水浴。

3.5 调温电炉或酒精灯。

3.6 锥形瓶250mL(石英或低硼玻璃)。

3.7 回流冷凝管(石英或低硼玻璃)。

3.8 蒸发皿50mL(石英或聚乙烯制品)。

3.9 刻度移液管1.00mL,5.00mL,20.0mL。

3.10 聚乙烯瓶30mL,60mL,1000mL。

3.11 中速滤纸11cm。

4 试剂

试验中所有用水，均为去离子水或石英蒸馏器重蒸馏水。

4.1 95％乙醇(GB 679分析纯)。

4.2 硫酸镁溶液：10.00g MgSO₄·7H₂O (GB 671，分析纯)溶于1OOmL水中。

4.3 姜黄素-草酸溶液：称取0.040g姜黄素和5.00g草酸(HG 3-988，优级纯)溶于100mL 95％乙醇中(4.1)，充分搅动使之溶解完全，贮于棕色玻璃瓶中。此液应在使用前一天配制好，密闭好存放在冰箱内可使用一周。

4.4 硼标准溶液：称取0.5720g于燥的硼酸(GB 628，优级纯)溶于水中，定容至1L，盛于塑料瓶中。此液为100ug/mL硼贮备溶液。将此硼贮备溶液稀释10倍，即为10ug/mL硼标准工作液。

5 测定步骤

5.1 土壤有效硼的浸提

称取10.00g风干过2.0mm筛的土样于250mL锥形瓶中，按1:2土水比，加20.0mL水，连接冷凝管，文火煮沸5min，立即移开热源，继续回流冷凝5min(准确计时)，取下锥形瓶，加入2滴硫酸镁溶液(4.2)，摇匀后立即过滤，将瓶内悬浮液一次倾入滤纸(3.11)上，滤纸承接于聚乙烯瓶内。

同一试样做两个平行测定。

同时用水按上述提取步骤制备空白溶液。

5.2 显色测定

移取1.00mL滤液于50mL蒸发皿内(3～8)，加4.00mL姜黄素-草酸溶液(4.3)，在恒温水浴(55±3)℃上蒸发至干，自呈现玫瑰红色时开始计时继续烘焙15min，取下蒸发皿冷却到室温，加入20.0mL 95％乙醇(4.1)，用橡胶淀帚擦洗皿壁，使内容物完全溶解，用中速滤纸过滤到具塞容器内(此溶液放置时间不要超过3h)，以95％乙醇(4.1)为参比溶液，在分光光度计550nm波长处，用1 cm光径比色皿测定吸光度。

注：①若土壤中硝酸根含量超过20ug/g时，对显色有干扰，须吸取一定量的滤液加饱和氢氧化钙溶液，放在水浴上蒸干后灼烧破坏硝酸根，然后用0.1mol/L盐酸溶解残渣，再进行显色。

②待测液及空白溶液与标准系列溶液的显色条件，(如温度、容器的种类与体积、蒸发的速度)必须严格保持一致。

5.3 工作曲线绘制

用10 ug/mL硼工作溶液(4.4)，按0,0.1ug/mL, 0.2ug/mL,0.4ug/mL,0.6ug/mL,0.8ug/mL,1.0ug/mL硼浓度配成硼标准系列溶液，分别吸取1.00mL按5.2操作显色测定吸光度并绘制工作曲线。

6.分析结果计算

样品吸光度减去空白吸光度后，由工作曲线查得硼浓度。

土壤有效硼含量以mg/kg表示，按下式计算：

土壤有效硼含量=2c

式中 c—样品吸光度由工作曲线查得硼浓度，mg/kg;

2—水土比。

注：如果土壤有效硼含量较高时，待测液中硼超过1ug/mL时，应将滤液稀释后进行显色。计算时乘以稀释倍数。

7 平行结果的允许差

两平行测定结果用算术平均值表示，保留小数后二位数字。

两平行样测定结果的允许差：土壤有效硼小于0.2mg/kg硼时，为0.03mg/kg；有效硼在0.2～0.5mg/kg时，为0.05mg/kg；有效硼大于0.5mg/kg时，相差不超过0.06mg/kg。