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丁型肝炎病毒

发布时间:2017-09-21 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:517

1977年,意大利学者Mario Rizzetto和他的同事在研究HBV感染的严重肝炎患者时发现了丁型肝炎病毒(hepatitis D virus, HDV)。HDV属于δ病毒属(Deltavirus)。

一、生物学特性

1.形态结构 HDV呈球形,直径约36 nm,有包膜,但由HBV编码,是HBV的表面抗原(HBsAg)。衣壳蛋白呈球形,直径约19 nm,由约200个丁型肝炎病毒抗原(Hepatitis D antigen, HDAg)分子组成,内含有一个单链环状RNA基因组。

2.基因组结构 HDV基因组为单负链环状RNA,长度约1.7 kb,是已知动物病毒中最小的基因组。病毒RNA分子中约有74%的碱基互相配对而形成杆状结构。HDV是一种缺陷病毒,需要HBV的辅助才能进行复制。HDV RNA复制时在宿主细胞中有三种形式,即环状基因组RNA、环状互补反基因组RNA(antigenomic RNA)和长度为0.8 kb的线形多腺苷酸化的反基因组RNA(mRNA),并由mRNA编码HDAg。HDAg是HDV编码的唯一蛋白。HDAg有大HDAg(L-HDAg)和小HDAg(S-HDAg)两种形式,分别为27000和24000。S-HDAg对HDV复制起正调控作用,而L-HDAg对HDV复制起负调控作用。HDAg主要存在于肝细胞内,在血清中出现早,维持时间短,故不易检测到。但HDAg可刺激机体产生抗体,故可自感染者血清中检出抗-HD。应用抗-HD还可检测肝组织中的HDAg。基因组RNA及反基因组RNA上都含有一段长85 nt具有核酶特性的序列,这是HDV所特有的特性。基于序列分析,HDV有8个基因型。HDV基因型1呈世界性分布,基因型2和4主要发现于日本和中国台湾地区;基因型3发现于亚马逊盆地;在出生于非洲,移民到北欧的个体中发现了基因型5~8。

3.敏感动物与细胞HDV和HBV类似,黑猩猩和上拨鼠对其敏感,并可作为研究HDV的动物模型。HDV可在人源和土拨鼠肝细胞中进行初始培养。

二、临床意义

HDV属于缺陷病毒,必须在HBV辅助下才能复制,故HDV流行病学特点及传染途径均类似于HBV。HDV感染后可表现为急性肝炎和慢性肝炎,其感染方式有两种。①同步感染(coinfection):同时感染HBV和HDV。②重叠感染(superinfection):已被HBV感染或已是HBV携带者再被HDV感染。90%急性同步感染患者可以恢复,但也可导致病情加重。通过黑猩猩动物实验表明,同步感染比单独HBV感染肝炎表现更为严重。HDV慢性感染比慢性HBV单独感染导致更为严重的肝脏疾病,并且会加速肝脏纤维化进程,增加患肝细胞癌的危险性。世界上3.05亿HBV感染者中约有1500万HDV携带者,且呈现世界性分布。中部非洲、亚马逊盆地、东部及中部欧洲、中东及部分亚洲国家属HDV感染的高发区,HBV高感染区并不意味HDV也呈高度感染状态,如中国、越南等国家HBV与HDV同时感染少见。

三、微生物学检查

1.免疫学检测

(1) HDV抗原:HDAg检测是诊断HDV感染的直接证据,采用直接免疫荧光法检测肝活检组织中HDAg是诊断HDV感染的金标准。也可采用EIA及RIA检测血清中HDAg,但HDAg在血清中持续时间短,平均仅21天左右,因此,标本采集时间是决定检出率的主要因素。由于HDAg总是存在于HBsAg所包裹的颗粒内部,故检测HDAg需用去污剂对病毒颗粒进行裂解以暴露其内部的抗原。血清HDAg阳性主要见于急性丁型肝炎的早期,在慢性HDV感染中,HDAg可呈波动性反复阳性。

(2)抗-HDV IgM和抗HDV总抗体:采用捕捉法ELISA检测抗-HDV IgM,在HDV急性感染时,抗-HDV IgM是首先可以检出的抗体,尤其是同步感染时,抗-HDV IgM往往是唯一可检出的HDV感染标志物。由于抗-HDV IgM可在慢性感染中持续存在,同时也可以高滴度存在于严重的急性丁型肝炎患者中,故抗-HDV IgM不能区别急性和慢性HDV感染。采用竞争法检测抗HDV总抗体,在慢性 HDV感染中,其抗HDV总抗体持续高滴度,即使HDV感染终止后仍可持续存在数年。

2.核酸检测 检测血清中HDV RNA是诊断活动性HDV感染最可靠的方法。采用RT-PCR和核酸杂交法检测,其敏感性和特异性均较高。HDV RNA阳性提示存在HDV感染及病毒复制。HDV RNA定量检测可以分析患者抗病毒治疗后的效果,HDV RNA在血清中的浓度与疾病进程和肝纤维化程度无关。

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