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革兰阴性无芽胞厌氧杆菌

发布时间:2017-09-07 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:2202

革兰阴性无芽胞厌氧杆菌是临床厌氧菌感染中最常见的病原菌,主要有类杆菌属、普雷沃菌属、卟啉单胞菌属和梭杆菌属等。它们属于人体的正常菌群,部分菌株可作为条件致病菌而引起机体感染。

一、类杆菌属

类杆菌属(Bacteroides)是临床上最重要的无芽胞厌氧菌,目前属内有78个种和5个亚种。与人类感染有关的约有10个菌种,其DNA的G+C的摩尔分数为40%~48%。脆弱类杆菌(B.fragilis)为本属细菌的代表菌种。

1.临床意义类杆菌是寄生于人类口腔、肠道及女性生殖道的正常菌群,可引起人体各组织器官的内源性感染,如菌血症,败血症,颅内、胸腔、腹腔及女性生殖道感染等。其中以脆弱类杆菌最多见,可占临床厌氧菌分离株的25%,为类杆菌分离株的50%。

2.微生物学检验标本直接涂片、革兰染色镜检,可见革兰阴性杆菌,大小为(0.8~1.3) um×(1.6~8.0)um,着色不均,两端钝圆而浓染,中间不着色或染色较浅,形似空泡,具有多形性。无鞭毛、无芽胞,脆弱类杆菌可形成荚膜。专性厌氧,营养要求较高,分离培养时培养基中需加入氯化血红素和维生素K1。在厌氧血琼脂平板上,厌氧环境培养24~48 h后,形成直径1~3 mm的圆形微凸、表面光滑、半透明、边缘整齐的灰白色菌落,多数菌株不溶血。在胆汁七叶苷(BBE)培养基中生长较好,菌落较大,能分解七叶苷,使培养基呈黑色,菌落周围有黑色晕圈。

主要生化特征:发酵葡萄糖、麦芽糖和蔗糖,水解七叶苷,触酶试验阳性,硝酸盐还原和脲酶试验阴性。

二、普雷沃菌属

普雷沃菌属(Prevotella )是从类杆菌属分出的一个新菌属,有20个菌种,其中产黑色素的有8个种,不产色素的有12个种。该菌属细菌DNA的G+C的摩尔分数为40%~52%。产黑色素普雷沃菌(P.metaninogenica)是本菌属的代表菌种。

1.临床意义普雷沃菌是寄生于人的口腔和女性生殖道等部位的正常菌群,在一定条件下可以引起内源性感染,主要引起牙周炎、齿龈炎、前庭腺炎、尿道旁腺炎、阴道脓肿、子宫内膜炎等,常与其他厌氧菌、需氧菌或兼性厌氧菌混合感染。

2.微生物学检验标本涂片、革兰染色镜检可见普雷沃菌为革兰阴性,呈球杆状,大小为(0.8~1.5)um×(1.0~3.5)um,两端钝圆,中间着色不均呈空泡状,成双或短链状排列。在含糖的培养基中孵育后菌体长短不一,具有多形性。无英膜、鞭毛和芽胞。

专性厌氧,营养要求较高,分离培养时培养基中需加入氯化血红素和维生素K1等以促进其生长,在厌氧血琼脂平板上生长较好,培养48 h后可形成圆形、微凸、半透明的菌落,多数菌株呈β溶血。产黑色素的细菌菌落初期为灰白色,随后呈黄色并逐渐变为浅棕色,5~7天后再变为黑色。在黑色素产生之前,用波长366 nm紫外线照射,可见橘红色荧光,但色素出现后荧光即消失。黑色素只在含血液的培养基上才能产生,在卡那-万古霉素冻溶血琼脂平板(KVLB)上早期可产生黑色素。本属绝大多数菌株对20%胆汁敏感,在含20%胆汁的培养基中不生长。

主要生化特征:多数菌种发酵葡萄糖、乳糖和蔗糖,不水解七叶苷,不产生吲哚,触酶和脂酶试验阴性。

三、卟啉单胞菌属

卟啉单胞菌属(Porphyromonas)也是从类杆菌属中分出的一个新菌属。有13个种,与人类有关的主要是不解糖叶琳单胞菌(P.asaccharolytica)、牙髓叶啉单胞菌(P.endodontalis)和牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis) 3个菌种,其DNA的G+C的摩尔分数为45%~54%。不解糖叶琳单胞菌为本属代表菌种。

1.临床意义叶琳单胞菌属主要存在于人的口腔、肠道和泌尿生殖道中,可引起人的牙周炎、牙髓炎、根尖周炎、胸膜炎、阑尾炎及阴道炎等。被动物咬伤后也可引起皮肤和软组织感染。

2.微生物学检验卟啉一单胞菌属的细菌为革兰阴性杆状或球杆状,大小为(0.5~0.8)um×(1.0~3.5) um。两端钝圆,染色不均,无芽胞、无鞭毛。专性厌氧,最适生长温度为37℃,营养要求较高,分离培养时培养基中需加入氯化血红素和维生素K1以促进其生长及黑色素的产生。本属细菌均产生黑色素,在厌氧血琼脂平板上,厌氧培养3~5天后形成圆形、凸起、光滑、有光泽的棕色菌落,继续培养6~10天后菌落逐渐变为黑色。在色素产生之前,用波长为366 nm的紫外线照射,可见红色荧光。应注意与产黑色素普雷沃菌鉴别,本属细菌均不发酵糖类。触酶、脂酶和胆汁七叶苷试验均为阴性,能液化明胶,吲哚试验大多阳性。

四、梭杆菌属

梭杆菌属(Fusobacterium)因其形态细长、两端尖细如梭形而得名。本属细菌共有16个种,具核梭杆菌(F.nucleatum)为本属的代表菌种,其DNA的G+C的摩尔分数为26%~34%。

1.临床意义梭杆菌属是存在于人类口腔、上呼吸道、胃肠道和泌尿生殖道的正常菌群,可引起牙髓炎、奋森溃疡性咽峡炎、肺脓肿、胸腔感染,也可引起腹腔、肠道、泌尿生殖道感染及菌血症等。临床感染中以具核梭杆菌最常见,以坏死梭杆菌毒力最强,可在儿童或年轻人中引起严重感染,是年轻人扁桃体周围脓肿中最常分离到的厌氧菌。

2.微生物学检验采集脓液和分泌物等标本,直接涂片、革兰染色镜检,本属细菌为革兰阴性杆菌,菌体细长,大小为1 um×(5~10)um,常呈多形性。典型的形态特征为梭形,两端尖细、中间膨大,有时菌体中有革兰阳性颗粒存在。无鞭毛、无芽胞。
专性厌氧,对无氧条件要求较高,在厌氧血琼脂平板上,厌氧培养48 h后形成直径1~2 mm、圆形、中央凸起、边缘不整齐,透明或半透明的菌落,呈面包屑样,一般不溶血,菌落有恶臭味。

主要生化特征:大部分菌种对胆汁敏感,在含20%胆汁培养基中不生长。多数菌株不发酵糖类,不水解七叶苷、不还原硝酸盐,触酶和脂酶试验阴性。少数菌株葡萄糖、果糖可出现弱发酵反应。大多数菌种吲哚和DNA酶试验阳性。

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