一、产单核细胞李斯特菌

产单核细胞李斯特菌（Listeria. monocytogenes）属于李斯特菌属。本菌属还包括伊氏李斯特菌（L.ivanovii)、格氏李斯特菌（L.grayi)、威氏李斯特菌（L.wel shimeri)等菌种，引起人和动物疾病的主要是产单核细胞李斯特菌。

（一）生物学特性

1．形态结构 革兰阳性短小杆菌，大小为（0.4～0.5) um×(1.0～2.0) um，直或微弯，常呈V形成双排列，偶可见呈双球状。有鞭毛，在25℃运动活泼,35℃时动力缓慢，不产生芽胞，一般不形成荚膜，在含血清的葡萄糖蛋白胨水中能形成黏多糖荚膜。幼龄培养物为革兰阳性，陈旧培养物可转为革兰阴性，呈两极着色，易误认为是双球菌。

2．培养特性本菌为兼性厌氧菌，营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液、血清、腹腔积液等培养基上生长更好。在血琼脂平板上于35℃培养18～24 h，可形成较小、圆形、光滑的灰白色菌落，有狭窄β溶血环，往往需要把菌落刮去才可见菌落下面的β溶血环。在肉汤培养基中均匀混浊生长，表面有菌膜形成。接种于半固体培养基内，置室温孵育可出现倒伞形生长。在4～45℃均能生长，最适生长温度为30～37℃。由于其在4℃能生长故可进行冷增菌。

3．生化反应分解葡萄糖、麦芽糖、鼠李糖、水杨苷，产酸不产气，七叶苷、甲基红和VP试验阳性，触酶阳性，不分解甘露醇、木糖、蔗糖，吲哚、脲酶、硝酸盐还原阴性。

4．抗原成分根据菌体及鞭毛抗原的不同，将其分为4个血清型和多个亚型。Ⅰ型主要感染啮齿类动物，4型主要感染反刍类动物。各型对人类均可致病，以1a,2b和4b亚型最为多见，4b亚型毒力最强。本菌与葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌及大肠埃希菌等有共同抗原。

5．抵抗力在土壤、粪便、青储饲料和干草中能长期存活。本菌耐盐（于200 g/L NaCl溶液中长期存活）、耐碱（于25 g/L NaOH溶液中20 min才能杀灭），对酸、对热较为敏感，60～70℃加热5～20 min可死亡。对常用消毒剂敏感，25 g/L苯酚,70％的乙醇5 min即可杀灭本菌。

（二）临床意义

产单核细胞李斯特菌广泛分布于水、土壤，也可存在于人和动物粪便中。常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增多症，也可引起脑膜炎、败血症及流产。易感者为新生儿、孕妇及免疫功能低下者，且感染后死亡率较高。也可因污染奶制品等引起食物中毒。健康带菌者是本病的主要传染源，传播途径主要为粪-口传播，也可通过胎盘和产道感染新生儿；与病畜接触可致眼和皮肤的局部感染。产单核细胞李斯特菌的致病物质主要为李斯特溶素和菌体表面成分。本菌为胞内寄生菌，主要依靠细胞免疫将其清除。

产单核细胞李斯特菌尚能引起鱼类、鸟类和哺乳动物疾病，引起牛、绵羊的脑膜炎、家畜流产等。

（三）微生物学检查

1．标本采集根据感染部位的不同可采集不同标本，如血液、脑脊液、呕吐物、粪便、分泌物、新生儿脐带残端、羊水等。

2．直接显微镜检查取标本涂片、直接显微镜检查，可见本菌为革兰阳性短小杆菌，常呈V字形排列，偶可见双球状。无芽胞，无荚膜。

3．分离培养取血液或脑脊液离心沉淀物接种于2支心脑浸液培养基，一支置10％CO₂环境35℃培养，24 h,48 h各转种血琼脂平板或萘啶酸选择性琼脂平板一次；另一支置4℃培养，每24 h做一次平板分离，连续4次，以后每周分离一次，至少4周，用冷增菌法可提高阳性率。分泌物、组织悬液、粪便等可直接划线分离，也可置4℃培养增菌后再分离，培养后观察菌落特征。

4．鉴定本菌特征：革兰阳性短杆菌，菌落较小，有狭窄的β溶血环；25℃有动力，35℃无动力或动力缓慢。触酶阳性，CAMP试验阳性，分解葡萄糖、水杨苷、七叶苷，硝酸盐还原阴性。李斯特菌属常见菌种的主要特征见表22-2，必要时作血清学鉴定与分型。

表22-2李斯特菌属常见菌种的主要特征

注；v表示11％～89％菌株阳性，NA表示无资料。

产单核细胞李斯特菌可能因培养条件不同而呈链状，35℃培养时动力阴性，CAMP试验阳性，常误判为无乳链球菌，可用触酶试验进行鉴别：链球菌触酶试验阴性，产单核细胞李斯特菌为阳性。本菌具有耐盐、耐碱、耐胆汁的特点，易被误判为粪肠球菌，亦可用触酶试验加以鉴别。幼龄培养物呈革兰阳性，培养48 h后多转为革兰阴性，因此，当遇到25℃培养有动力的杆菌而不符合革兰阴性杆菌时，应考虑到产单核细胞李斯特菌。

产单核细胞李斯特菌与红斑丹毒丝菌、棒状杆菌鉴别见表22-3。

表22-3产单核细胞李斯特菌与红斑丹毒丝、棒状杆菌的鉴别

注：v表示11％～89％菌株阳性。

二、红斑丹毒丝菌

红斑丹毒丝菌（E.rhusiopathiae）属于丹毒丝菌属（Erysipelothrix)，是丹毒丝菌属中的代表菌种。

（一）生物学特性

红斑丹毒丝菌为革兰阳性菌，与放线菌的形态相似，易被脱色呈阴性。光滑型菌落涂片镜下可见菌体呈杆状、球杆状或细长、直或弯曲，单个存在或形成链状，杆状菌体大小为(0.2～0.4)um×(1.0～2.0)um；粗糙型菌落涂片可呈长链丝状或分枝状，与放线菌相似。无芽胞、无鞭毛、无荚膜。

兼性厌氧，初次分离在5％CO₂环境、在含有葡萄糖或血清的培养基中生长旺盛。在血琼脂平板上35℃培养24～48 h后可形成两种菌落。①光滑（S)型菌落：菌落细小、圆形、光滑、透明、凸起、边缘整齐，质软，易混悬于液体中，毒力较强。②粗糙（R）型菌落：菌落较大，表面呈颗粒状、扁平、不透明、边缘不整齐，呈α溶血或不溶血。在亚碲酸钾血琼脂平板上，形成黑色菌落。在半固体琼脂表面下数毫米处发育最佳，常呈带状。在葡萄糖肉汤中轻微混浊生长，底层有少量沉淀。

能分解葡萄糖、乳糖、阿拉伯糖，不分解甘露醇和蔗糖，精氨酸双水解酶试验阳性，明胶、胆汁七叶苷、脲酶、触酶、硝酸盐还原试验均为阴性。在三糖铁（TSI）培养基中可产生H2S是该菌的特点。

本菌对湿热及常用消毒剂敏感。但对苯酚的抵抗力较强，在5 g/L的苯酚中可以存活90多天，故可利用此法处理污染的标本，提高分离率。另外，红斑丹毒丝菌对盐、腐败、干燥和日光有一定的耐受性，与该菌的传播有关。

（二）临床意义

红斑丹毒丝菌广泛存在于自然界，是人畜共患病的病原菌之一。红斑丹毒丝菌引起的红斑丹毒丝菌病是一种急性传染病，主要发生在家畜、家禽和鱼类，人类主要因接触带菌动物（经破损皮肤）而感染。感染后局部可出现皮肤红肿、疼痛或有痒感，继而可发展成淋巴管炎，称为类丹毒。也可引起急性败血症或心内膜炎。本菌若污染奶及奶制品也可引起食物中毒。

红斑丹毒丝菌可产生透明质酸酶而使血管通透性增高，神经氨酸酶可促使DIC形成，导致微循环障碍，发生酸中毒、出血和休克。

（三）微生物学检查

1．标本采集疑似败血症或心内膜炎患者可采集血液，其他患者可采集皮肤病灶局部的脓液或渗出液。受损部位的组织是检测类丹毒的最佳标本。

2．直接显微镜检查镜检可见革兰阳性细长杆菌，有分枝及断裂，形态似放线菌。该菌易被脱色而呈革兰阴性杆菌，其间夹杂革兰阳性颗粒。

3．分离培养局部感染标本可直接接种于血琼脂平板或将标本接种于含1％葡萄糖的营养肉汤中，置于5％CO₂环境,35℃增菌培养，然后用含5％兔血的心浸液琼脂平板或血琼脂平板进行分离培养。血液标本需先增菌再以血琼脂平板进行分离培养。

4．鉴定红斑丹毒丝菌的主要特征：革兰阳性细长杆菌，在血琼脂平板上形成细小、光滑型菌落或较大粗颗粒型菌落，无动力，触酶、氧化酶阴性，能分解葡萄糖和阿拉伯糖，胆汁七叶苷,VP,吲哚阴性，在TSI中可产H₂S。

与产单核细胞李斯特菌鉴别的主要依据：红斑丹毒丝菌分解阿拉伯糖，在TSI上产生H₂S,而产单核细胞李斯特菌则均为阴性；红斑丹毒丝菌为触酶阴性、α溶血或不溶血的菌落，产单核细胞李斯特菌为触酶阳性、3溶血。

5．动物毒力试验红斑丹毒丝菌对小鼠及鸽子尤为敏感，取培养2～4天的肉汤培养物0.2 mL，小白鼠腹腔内注射，4～5天后，小白鼠可因败血症而死，取其心血培养可分离到红斑丹毒丝菌。