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弯曲菌属分类和临床意义

发布时间:2017-09-04 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:4799

弯曲菌属(Campylobacter)是一类弯曲呈逗点状、S形或海鸥展翅形的革兰阴性菌,有一个或多个螺旋,大小为(0.2~0.5) um×(0.5~5.0) um。有动力,运动非常活泼。营养要求高,生长较缓慢,培养时需要微需氧气体环境。通常不分解糖类,氧化酶阳性。广泛分布于温血动物,常定居于家禽及野鸟的肠道内。模式菌种为胎儿弯曲菌。

一、分类

弯曲菌属归于弯曲菌目弯曲菌科,至少有30个种和亚种。对人致病的有空肠弯曲菌空肠亚种(C.jejuni subsp.jejuna)、空肠弯曲菌多伊尔亚种(C.jejuni subsp. doylei)、大肠弯曲菌(C.coli)、胎儿弯曲菌胎儿亚种(C.fetus subsp. fetus)、胎儿弯曲菌性病亚种(C. rectus subsp.venerealis),简明弯曲菌(C.concisus)、曲形弯曲菌(C. curves)、直肠弯曲菌(C. rectus) ,昭和弯曲菌(C. showae)、纤细弯曲菌(C. gracilis)、红嘴鸥弯曲菌(C.lari)、豚肠弯曲菌豚肠亚种(C. hyointestinalis subsp. hyointestinalis)、乌普萨拉弯曲菌(C. upsaliensis),痰液弯曲菌痰液生物变种(C. sputorum biovar sputorum)等,其中以空肠和大肠弯曲菌较常见。

二、临床意义

弯曲菌属细菌对人和动物有致病性。在人类和动物的生殖道、肠道、口腔中存在,多引起人类肠道感染,但这种感染通常是自限性的,一般不需进行抗菌药物治疗。另外弯曲菌属细菌也可引起肠道外感染,尤其是艾滋病和其他免疫缺陷者。空肠弯曲菌是腹泻最常见的病原菌之一,主要通过污染食物、牛奶和水而经口传播,感染者和动物粪便中的细菌可污染环境。

弯曲菌的鞭毛在肠道定植中起重要作用,空肠/大肠弯曲菌能够产生肠毒素、细胞毒素和内毒素等物质,引起急性肠炎。此外空肠/大肠弯曲菌感染后可引发吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barre syndrome, GBS)和反应性关节炎。GBS是急性外周神经脱髓鞘性疾病。

简明弯曲菌、曲形弯曲菌、直肠弯曲菌、昭和弯曲菌、纤细弯曲菌和胎儿弯曲菌性病亚种主要引起肠外感染,可致牙周疾病和头、颈、内脏的深部感染及败血症等。

三、微生物学检验

(一)检验程序

弯曲菌属的检验程序见图20-1。

图20-1弯曲菌属的检验程序

(二)标本采集

最常见的标本是粪便(包括肛拭子)和血液,标本采集后要立即送检。弯曲菌抵抗力不强,在室温下可迅速死亡,对热敏感,如预计2h内不能送检时,粪便标本应接种于卡-布(Cary-Blair)运送培养基上,置4℃保存,标本在4℃可保存3周。

(三)标本直接检查

1.直接显微镜检查粪便与肛拭子可直接镜检,查找革兰阴性呈弧形、S形、“海鸥展翅形”或螺旋形的小杆菌;用暗视野或相差显微镜观察,检查有无“投镖样”或“螺旋样”运动的细菌。

2.核酸检测可用PCR方法检测粪便中弯曲菌的核酸。

(四)分离培养与鉴定

1.分离培养应侧重于空肠和大肠弯曲菌的检查,能否检出弯曲菌的关键在于选择培养基和最佳孵育条件。粪便或肛拭子等标本可直接接种于弯曲菌选择平板上,如改良的Skinowr's培养基、Campy-BAP等,血液应先接种于布氏肉汤中,37℃增菌后再转种于分离培养基。接种后的平板应置于微氧环境培养,培养的最佳气体环境为含5% 02,10%C02及85% N2。空肠和大肠弯曲菌最适生长温度为42℃,一般培养7h后观察菌落;胎儿弯曲菌最适生长温度是37℃,一般培养至少72 h到7天后观察菌落;故临床标本需要分别置于37℃和42℃中培养,方不至于漏检。

弯曲菌有特别的菌落特征:菌落细小,可表现为粉红色、灰色、灰白色或黄灰色、轻微黏液样外观,有些菌落沿接种线有拖尾样外观。依据使用的培养基不同,其他类型的菌落也经常可以观察到。

2.鉴定弯曲菌属的细菌均不分解糖类,不能在3.5% NaCI条件下生长,不能在空气环境中培养,弯曲菌属主要致病种的生理、生化特征见表20-1。鉴定要点如下。①革兰阴性菌,菌体弯曲或呈S形、海鸥展翅形,氧化酶和触酶阳性,生长温度为37℃与42℃。②空肠弯曲菌通常对萘啶酸敏感、对头孢噻吩耐药,而胎儿弯曲菌对萘啶酸耐药、对头孢噻吩敏感。但近年出现了对萘啶酸耐药的空肠弯曲菌。③在形态、培养等条件符合的基础上,凡马尿酸盐水解试验阳性、在42℃条件下生长、氧化酶阳性且与镜检形态相符者,即可报告为空肠弯曲菌空肠亚种。④醋酸吲哚水解试验:空肠和大肠弯曲菌为阳性,胎儿弯曲菌为阴性。

表20-1弯曲菌属主要致病种的生理、生化特征

注:+表示大部分菌株阳性;-表示大部分菌株阴性;V表示不定;S表示敏感;R表示耐药。

(五)其他检测方法

1.免疫学方法用特异性抗体包被的乳胶颗粒,可用于鉴定空肠和大肠弯曲菌。也可采用酶联免疫方法测定粪便中弯曲菌抗原进行诊断,血清中抗体测定主要用于流行病学调查。

2. DNA-DNA杂交和PCR扩增DNA-DNA杂交在弯曲菌菌种的分类研究中是一种成功的参考方法,PCR扩增技术也正在发展中。

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