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鲍特菌属生物学特性和临床意义

发布时间:2017-09-03 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:6292

一、分类

鲍特菌属(Bordetella)包括百日咳鲍特菌(B.pertussis)、副百日咳鲍特菌(B.para pertussis)、支气管败血鲍特菌(B.branchiseptica)、鸟鲍特菌(B.avium)、欣氏鲍特菌(B.hinzii)、霍氏鲍特菌(B.holmesii)和创口鲍特菌(B.trematum)7个菌种。鲍特菌属细菌DNA的G+C的摩尔分数为66%~70%。百日咳鲍特菌是其代表菌种,也是临床最常见的致病菌,俗称百日咳杆菌。

二、生物学特性

鲍特菌为革兰阴性球杆菌,无芽胞,某些菌株有鞭毛,光滑型菌株有荚膜。专性需氧,最适生长温度为35~37℃,最适pH6.8~7.0,营养要求比较高,血琼脂和巧克力琼脂平板上均不能生长,需要在含血液、马铃薯和甘油的鲍-金(Bordet-Gengou, B-G)培养基上才能生长,因为细菌在生长过程中会产生过多的脂肪酸而抑制其生长,所以在培养基中需添加活性炭以吸附多余的脂肪酸,因此,添加了木炭、去纤维马血的CHB培养基更适于鲍特菌的生长。百日咳鲍特菌培养3~5天才能长出肉眼可见细小光滑、灰色不透明的露滴状菌落,并有狭窄的溶血环。

三、临床意义

百日咳鲍特菌是百日咳的病原菌,主要侵犯婴幼儿呼吸道,通过飞沫传播。细菌感染人体后附着于气管和支气管纤毛上皮细胞上,生长繁殖并产生多种毒素,如百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin, FHA)、气管细胞毒素(tracheal cytotoxin)等,引起局部炎症、细胞坏死,纤毛运动受抑制,黏稠的分泌物增多而不能排出,导致剧烈咳嗽。病程分为卡他期、痉咳期和恢复期,因病程较长,可达数周至数月,故称为百日咳。卡他期症状较轻,但传染性最强,细菌分离阳性率最高。病后可获得持久免疫力,很少再次感染。副百日咳鲍特菌也可引起人类百日咳及急性呼吸道感染,但症状较轻。支气管败血鲍特菌主要引起狗和猪的感染,极少从人体分离。

四、微生物学检查

1.检验程序鲍特菌的检验程字见图18-2。

图 18-2鲍特菌的检验程序

2.标本采集通常在发病早期(1周内)采集鼻、咽拭子,做床边接种或立即送至实验室,采集时间越迟其阳性率越低,对小儿也可用咳碟法采集标本。

3.直接镜检 标本涂片、革兰染色镜检,检查革兰阴性小杆菌,其阳性率较低。

4.分离培养 将标本同时接种于巧克力平板和B-G平板或CHB平板,为提高检出率,培养基中可加入头孢氨苄抑制杂菌,置于35℃孵箱培养,3~4天可看到菌落,如果培养7天,在B-G平板或CHB平板上仍无生长现象可判断为阴性。

5.鉴定首先观察巧克力平板上是否有细菌生长,并观察在B-G平板或CHB平板上菌落特征,结合细菌形态及染色特点,以及触酶试验和氧化酶试验,进行初步鉴定,然后根据硝酸盐还原、脲酶等试验进一步鉴定到种。鲍特菌属菌种的主要鉴别特征见表18-3。百日咳鲍特菌在巧克力平板上不生长,以此可与属内其他菌相鉴别,另外,百日咳鲍特菌生化反应极不活泼,不发酵任何糖类。

表18-3鲍特菌种间主要鉴别特征

6.抗原检测常采用直接荧光抗体(DFA)法。将标本涂片,用荧光素标记的特异性抗体进行染色,然后用荧光显微镜检查,菌体典型特征为外周呈蓝绿色荧光,中心为暗的球杆菌。镜下能看到5个典型形态者为阳性。检测时设阴性和阳性对照,标本中菌量大时,检出率较高,可用于百日咳的快速诊断。

7.核酸检测用PCR法检测标本中特异的DNA片段,特异性和敏感性都较好,但目前缺乏统一的质量控制标准。

8.血清学诊断对疑似百日咳的患者,可采用ELISA法检测其血清中的抗FHA IgG抗体和抗PTlgA,IgG抗体,其中抗PT lgA抗体只出现于感染患者中,接种疫苗对其没有影响,因此,对临床诊断更有价值。

9.药物敏感试验鲍特菌属细菌的抗菌药物敏感试验尚无标准操作方法及解释标准参考。研究发现鲍特菌的耐药性并未增强,对百日咳患者的治疗临床首选红霉素,其次为氨苄青霉素阿莫西林、利福平、复方SMZ等。

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