HPLC是在GC基础上发展起来的，气相色谱的基本概念及理论、定性定量方法等也摹本适用于HPLC。HPLC与GC的主要差别在于流动相和操作条件。在GC中，流动相是惰性气体，分离主要取决于组分分子与固定相之间的作用力；在HPLC中，流动相与组分之间有一定的亲和力，分离过程的实现是组分、流动相和固定相二者间相互作用的结果。由于HPLC采用颗粒极细的固定相，柱内压降很大，加上流动相黏度高，进样压力可达150～300 kg／㎡(14．7～29．4 MPa)．
         原则上讲，只要能溶解在流动相中的物质都可以用HPILC分析。目前已知的有机化合物中，有80％能用HPLC分析。此法不破坏样品，可方便地制备纯样。一般在室温下操作．试样只需在流动相中有一定溶解度，不受样品挥发性和热稳定性限制。适于分离沸点高、极性强、热稳定性差、离子型物质和生物大分子等。
         高效液相色谱仪主要由输液系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、榆测器、记录系统和辅助系统组成，所显示的色谱图与气相色谱类似。
         HPLC分析条件的选择主要包括洗脱溶剂及洗脱梯度的选择、色谱柱及检测器的选择等。流动相的选择要依据固定相的种类进行。乙腈和甲醇是最常用的液相色谱流动相。在液相色谱中，为了改善分离效率、缩短分析时问，经常需要连续改变流动相的离子强度、pH或极性。这种流动相配比连续变化的方式就是梯度冼脱，其作用与气相色谱中程序升温类似，分析复杂的混合物时有利于提高分离效率。
         根据样品中组分在固定相与流动相中作用方式的不同，可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱或排阻色谱等。水环境领域中常用的色谱柱是反向色谱柱，即柱内为非极性固定相，流动相则为水、甲醇或乙腈等极性溶剂。这对水样品来说，十分便利，使得水样无需再进行溶剂萃取便可直接进行分离和定量测定。
         HPLC检测器有紫外检测器(UVD)、二极管阵列检测器(DAD)、荧光检测器(FD)、示差折光检测器(RID)、电导池检测器(ECD)和极谱检测器(安培检测器)等。其中，UVD为选择性浓度型检测器，仅对在紫外波长下有吸收的物质有响应。灵敏度高、噪声低，在HPLC中应用最广，约占70％。FD灵敏度比UVD约高两个数量级，缺点是适用范围窄，有一定局限性。RID为浓度型通用检测器。它是根据流动相中出现组分时，流动相折射率发生变化而设计的。RID不能用梯度洗脱操作。由于检测器灵敏度较低，仅适用于例行分析，不能用于痕量分析。
  

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